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- 2026年02月04日
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- 详细信息
- 技术资料
- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
支原体肺炎模型
一、模型构建的核心方法
1. 动物选择与品系差异
| 物种 | 适用场景 | 操作要点 |
|---|---|---|
| 小鼠 | 机制研究、药物筛选（最常用） | - 品系：BALB/c（敏感性高）、C57BL/6（免疫研究） - 年龄：6-8周龄（免疫系统成熟） |
| 大鼠 | 病理学评价、抗生素药效试验 | - 品系：Wistar/SD（肺泡结构清晰） - 体重：200-300g（确保呼吸道容量） |
| 豚鼠 | 模拟人类呼吸道生理（气道直径更接近人） | 需定制感染剂量（文献较少） |
| 无菌小鼠 | 免疫机制研究（排除共生菌干扰） | 重复感染方可诱发典型肺炎（单次感染仅定植） |
2. 病原体制备与接种
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菌株来源：临床分离株或标准株（如FH、M129）
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培养条件：SP-4液体培养基，72小时培养至浓度≥10⁷ CCU/ml（颜色变化单位）
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接种方法：
途径 操作要点 优势/局限 鼻腔滴注 yi浅麻醉后滴入菌液（小鼠20-50μl，大鼠50-100μl） 操作简便，模拟自然感染；可能分布不均 气管内注射 麻醉后气管插管注入菌液（需显微操作） 病灶均匀；技术要求高，易致机械损伤 气雾吸入 雾化器暴露（浓度1×10⁹ CFU/ml，30分钟） 模拟空气传播；设备成本高
关键参数：
- 感染剂量：小鼠10⁷ CCU/ml，大鼠加倍
- 重复感染：每周1次×3周可诱导慢性炎症（单次感染仅急性病变）
二、模型评估体系
1. 病理学与影像学评估
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组织病理（金标准）：
- H&E染色：肺泡间隔增宽、淋巴样细胞浸润、支气管周围炎性渗出
- 电镜观察：透射电镜可见支原体附着于纤毛上皮（微管插入胞内）
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病理评分：
Szapiel评分标准（0-4分）：
0分：无病变
1分：局灶性肺泡炎（<25%视野）
2分：弥漫性肺泡炎+轻度间质增厚
3分：中度纤维化+肺泡结构破坏
4分：广泛实变
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影像学：Micro-CT显示肺纹理增粗、磨玻璃影（与人类CT特征一致）
2. 微生物与免疫指标
| 检测目标 | 方法 | 意义 |
|---|---|---|
| 支原体定植量 | PCR（16S rRNA基因） | 感染成功率验证（>10⁴拷贝/μg DNA为阳性） |
| 炎症因子 | ELISA（BALF） | TNF-α、IL-6、IFN-γ升高提示免疫激活 |
| 抗体应答 | 血清IgG/IgM检测 | 重复感染后显著升高（单次感染无响应） |
| 巨噬细胞极化 | 流式细胞术（CD86+/CD206+） | M1型增多驱动急性炎症 |
3. 功能学指标
- 肺功能：气道阻力（Rrs）↑、肺顺应性（Cst）↓
- 肺水肿：肺湿/干重比（W/D）>4.5（正常值3.5-4.0）
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