烟雾致大鼠慢性支气管炎模型

二、造模方法及操作步骤

1. 动物选择与分组

• 种属与品系：雄性SD大鼠（体重150–180 g）最常用，因其气道结构与人类相似且对烟雾敏感。
• 分组设计：通常设空白对照组、模型组及药物干预组，部分研究增设时间梯度组（如1/3/5/7周）以观察病理进展。

2. 烟雾制备与暴露方案

参数	标准方案	替代方案
烟雾配方	锯末110g + 烟叶10–11g + 辣椒3–4g + liu磺0.4–0.6g	锯末200g + 烟叶20g + 辣椒6g + liu磺1g
烟室体积	15 m³（小规模）	27 m³（大规模）
烟雾浓度	200 ng/m³（或150–200 mg/m³）	150–200 mg/m³
暴露频率	每日1次，每周6次	每日2次（强化模型）
持续时间	7周（49天）	44天（约6.3周）

关键操作：

• 混合材料需在20–30分钟内完全燃烧，确保颗粒直径0.5–1 μm以模拟可吸入颗粒物。
• 暴露后剔除间质性肺炎个体，避免混杂病理干扰。

3. 复合因素造模（可选）

为加速模型建立或模拟多重病因，可联合：

• 脂多糖（LPS）气管滴注：在烟雾暴露第1/8/15/22天注入LPS（200 μg），增强炎症反应。
• 细菌感染：交替滴注肺炎克雷伯杆菌菌液，模拟感染性支气管炎。

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三、模型验证指标

1. 病理学改变（金标准）

• 典型特征（HE染色）：
  • 支气管黏膜纤毛倒伏、脱落或溃疡形成。
  • 管腔黏液栓及炎性分泌物增多。
  • 杯状细胞增生、管壁纤维化增厚。
• 半定量评分：根据炎症细胞浸润程度、上皮损伤范围进行分级（0–3分），用于客观比较。

2. 炎症标志物动态变化

指标	早期（1周）	后期（≥5周）
炎症细胞总数	显著升高	持续高值
淋巴细胞比例	20–30%	增至50–60%
巨噬细胞比例	40–50%	降至20–30%
中性粒细胞比例	30–40%（急性期高峰）	恢复至正常水平

• 酶活性检测：肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性与病理评分呈正相关（P<0.01）。

3. 分子与细胞学指标

• 血清炎症因子：TGF-β、IL-6、IL-1β水平显著升高。
• 气道重塑标志物：肺组织胶原纤维沉积（Masson染色阳性）、MMP-9/TIMP-1比值失衡。