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- 上海
- 2026年01月04日
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上海申知心生物科技有限公司
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胰腺炎小鼠模型构建
一、常用胰腺炎小鼠模型构建方法
1. 雨蛙素（Cerulein）诱导急性胰腺炎（AP）
原理
雨蛙素（胆囊收缩素类似物）超剂量刺激胰腺腺泡细胞，导致酶原过早激活、炎症反应和胰腺水肿/坏死。
步骤
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动物准备：8-12周龄C57BL/6或BALB/c小鼠，禁食12小时（自由饮水）。
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药物配制：雨蛙素（Cerulein）溶解于生理盐水（常用剂量50-100 μg/kg）。
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腹腔注射：
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急性胰腺炎（AP）：每小时1次，连续注射6-10次（观察6-24小时）。
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慢性胰腺炎（CP）：每日1次，连续5天/周，持续4-6周。
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观察指标：
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血清检测：淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LPS）、炎症因子（IL-6、TNF-α）。
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组织病理：HE染色观察胰腺水肿、炎症浸润、坏死（评分标准：Schmidt或Spofford评分）。
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特点
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优点：操作简单、重复性好，适用于急性胰腺炎研究。
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缺点：自限性（通常24-48小时恢复），不适用于严重坏死性胰腺炎模型。
2. L-精氨酸（L-Arginine）诱导坏死性胰腺炎
原理
L-精氨酸超剂量导致腺泡细胞代谢紊乱，引发严重胰腺坏死和炎症。
步骤
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配制溶液：L-精氨酸（8-10% in PBS，pH 7.4）。
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腹腔注射：
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单次高剂量：4-5 g/kg，分2次（间隔1小时）注射。
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慢性胰腺炎：多次低剂量（2 g/kg，每周2次，持续4周）。
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观察时间：
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急性期：24-72小时（严重坏死）。
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慢性期：4周后纤维化形成（Masson染色检测胶原沉积）。
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特点
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优点：可模拟重症急性胰腺炎（SAP）和慢性胰腺炎纤维化。
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缺点：死亡率较高（需密切监测）。
3. 胆胰管逆行注射（DBTC模型，慢性胰腺炎）
原理
逆行注射 二ding基二氯化锡（DBTC） 或 牛磺胆酸钠（NaTc） 导致胰管阻塞、腺泡萎缩和纤维化。
步骤
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麻醉小鼠（异氟烷或戊巴bi妥钠）。
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开腹手术：找到胆胰管（近十二指肠处），微量注射器逆行注入：
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DBTC（1% in 乙醇:甘油 = 2:3，8 mg/kg）。
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NaTc（3-5%，0.1 mL/10g）。
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术后观察：
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急性期（3-7天）：胰腺水肿、炎症。
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慢性期（4周后）：纤维化（α-SMA、胶原沉积）。
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特点
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优点：适用于慢性胰腺炎、胰腺纤维化研究。
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缺点：手术难度较高，需熟练操作。
4. 基因工程模型（自发胰腺炎）
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KrasG12D突变：模拟胰腺导管腺癌前病变（PanIN）。
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CFTR敲除：囊性纤维化相关胰腺炎。
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Try7突变小鼠：胰蛋白酶原过早激活导致慢性炎症。
二、关键检测指标
| 检测目标 | 方法 |
|---|---|
| 胰腺损伤 | 血清淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LPS） |
| 炎症因子 | ELISA检测IL-6、TNF-α、IL-1β |
| 组织病理 | HE染色（水肿/坏死/炎症评分） |
| 纤维化 | Masson染色、α-SMA免疫组化 |
| 氧化应激 | MDA、SOD、GSH检测 |
| 细胞凋亡 | TUNEL染色、Caspase-3检测 |
三、注意事项
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模型选择：
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急性胰腺炎 → 雨蛙素、L-精氨酸。
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慢性胰腺炎 → DBTC、L-精氨酸多次注射。
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剂量优化：不同品系小鼠敏感性不同（如C57BL/6对L-精氨酸更敏感）。
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动物福利：
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L-精氨酸模型可能高死亡率，需密切监测。
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术后镇痛（如布洛芬饮水）。
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对照组设置：生理盐水或PBS注射对照。
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