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文献和实验细胞。在培养细胞过程中,任何移动、震动(包括开关培养箱门)都会导致细胞在培养板上的移动,从而得到不规则斑点或者斑点花纹,影响最终结果。因此细胞在ELISPOT培养板孵育的过程中,应注意保持培养板的静置,不应对其移动。 8. 在使用抗原刺激淋巴细胞培养过程中,我发现培养液变黄,有什么影响? 答:这种现象通常见于使用很强的多克隆抗原刺激淋巴细胞,某些多克隆抗原会导致淋巴细胞凋亡或者死亡,大量淋巴细胞死亡后使培养液变黄。使用这些淋巴
【trouble shooting】酶联免疫斑点(ELISPOT)FAQ
细胞。在培养细胞过程中,任何移动、震动(包括开关培养箱门)都会导致细胞在培养板上的移动,从而得到不规则斑点或者斑点花纹,影响最终结果。因此细胞在ELISPOT培养板孵育的过程中,应注意保持培养板的静置,不应对其移动。 8、在使用抗原刺激淋巴细胞培养过程中,我发现培养液变黄,有什么影响? 这种现象通常见于使用很强的多克隆抗原刺激淋巴细胞,某些多克隆抗原会导致淋巴细胞凋亡或者死亡,大量淋巴细胞死亡后使培养液变黄。使用这些淋巴细胞进行后续ELISPOT试验通常得到很低的斑点(SPOT)形成。换用特异
很大,每个步骤包括加样,温育,洗涤,显色,酶标仪读数均应认真负责才能充分发挥ELISA的高灵敏,强特异的优点。因此,应建立实验项目的标准操作程序(SOP)。加样加样应用微量移液器(加样枪)按规定的量加入微孔板的1/3处避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。每次加样应更换吸嘴,做到一人一吸头,以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。样本稀释,目的是为了减少非特异性反应,所以一定要先加稀释液后加样本,特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟,同时注意防止液体溢出。如后面操作步骤中加
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