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99
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北京诺博莱德科技有限公司
Oxoid Baird-Parker琼脂CM1167B,SR0054C,SR0047C,甘露醇盐琼脂CM1180B等葡萄球菌培养基
品牌:Oxoid
产地:英国
产品:各种葡萄球菌分离培养基,主要有:
Barid-Parker琼脂基础:CM0275B,新货号CM1167B
卵黄亚碲酸钾乳液:SR0054C
卵黄乳液:SR0047C
3.5%亚碲酸钾:SR0030J
甘露醇高盐琼脂:CM0085B,新货号CM1180B
对于金黄色葡萄球jun来说它无疑是致病菌,但是它不是食源性的致病菌,真正的食源性致病菌是金黄色葡萄球jun中某一类产生的金葡肠毒素。
一般常引起食物中毒的食品主要为肉、奶、鱼、蛋类及其制品等动物性食品,以及一些米面制品,也包括一些油脂含量较多的制品。
国标中GB4789.10-2010中三种检测金黄色葡萄球jun的方法,定性方法(主要用于要求不含金葡菌的食品),平板法(主要用于金葡菌含量较高的食品),MPN法(用于金葡菌含量不高的食品)
Baird-Parker卵黄亚碲酸盐培养基 Baird-Parker Egg Yolk Tellurite Medium
对食品中凝固酶阳性的葡萄球菌进行分离和计数的选择性培养基
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM1167B |
Baird-Parker琼脂基础 |
500g |
7.9L |
|
CM1127B |
Baird-Parker琼脂(ISO)基础 |
500g |
7.9L |
|
CM1127T |
5kg |
79L | |
|
SR0054C |
卵黄亚碲酸盐乳液 |
100ml |
2L |
|
SR0047C |
卵黄乳液 |
100ml |
|
|
SR0030J |
3.5%亚碲酸钾 |
10*2ml |
|
|
CM0961B |
Baird-Parker RPF琼脂基础 |
500g |
7.1L |
|
SR0122A |
RPF添加剂 |
10小瓶 |
每瓶配100ml |
Baird-Parker琼脂基础 CM1167,原货号CM0275
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
牛肉浸粉 |
5.0 |
|
酵母粉 |
1.0 |
|
丙tong酸钠 |
10.0 |
|
甘氨酸 |
12.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
琼脂 |
20.0 |
|
pH 6.8±0.2 @25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
使用说明:
取63g培养基至1L蒸馏水中,煮沸至溶解,121℃高压蒸汽灭菌15分钟,冷却至50℃,加入50ml的SR0054C,或者50ml的SR0047C+3ml的SR0030J,混匀倒平板。
产品描述:
Baird-Parker发明了此培养基,加入的丙tong酸钠保护了受损的细胞,并且增加了它们的恢复率,卵黄乳液作为一个诊断试剂,该培养基被国际上广泛应用于金黄色葡萄球jun的分离。
其中的选择性成分甘氨酸,氯化锂,亚碲酸钾的含量达到一个平衡点,正好抑制了除金黄色葡萄球jun之外的大部分食品中的细菌。
卵黄乳液的加入使培养基变成黄色,不透明,金黄色葡萄球jun与亚碲酸钾反应形成灰黑色发亮的菌落,然后通过蛋白水解作用在菌落周围形成透明环,这种具有透明环的灰黑色菌落作为金黄色葡萄球jun的诊断标志。进一步培养后,大部分金黄色葡萄球jun形成不透明的菌落环,这可能是由于脂肪酶的反应。并不是所有的金黄色葡萄球jun都有上述两种反应,有些腐生葡萄球菌的透明环和浑浊环都产生,但有经验的实验人员可通过更长时间的培养将他们与金黄色葡萄球jun区分开来。
没有卵黄乳液反应结果的金黄色葡萄球jun的典型菌落需要再做凝固酶实验。卵黄乳液反应阴性的金黄色葡萄球jun可能出现在一些食品中,特别是奶酪中。Smith and Baird-Parker发现加入50ug磺胺甲氧嘧啶至每ml培养基中,可以抑制变形杆菌的繁殖,含有变形杆菌的样本中的少数金黄色葡萄球jun然后才能恢复。
Baird-Parker卵黄亚碲酸盐培养基上的典型菌落特征:
|
Organism |
Growth |
Colony |
|
Staphylococcus epidermidis |
Variable |
Not shiny black and seldom produces clearing |
|
Staphylococcus saprophyticus |
Variable |
Irregular and may produce clearing. Wide opaque zones may be produced in 24hrs |
|
Micrococcus species |
Variable |
Very small in shades of brown and black. No clearing |
|
Bacillus species |
Variable |
Dark brown matt with occasional clearing after 48hrs |
|
Escherichia coli |
Variable |
Large brown-black |
|
Proteus species |
Variable |
Brown-black with no clearing |
|
Yeasts |
Variable |
White, no clearing |
技术要点:
1、在使用前至少要等琼脂表面干了再接种;
2、使用玻璃涂布棒,在琼脂表面干了后,接种0.1ml的食品稀释样品(在缓冲蛋白胨水中制备的),在最大的培养皿中最多接种0.5ml;
3、将接种后的培养皿置于35℃培养,24小时后检查金黄色葡萄球jun的典型菌落,阴性的平板继续培养24小时。
Baird-Parker琼脂(ISO)基础 CM1127
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
Pancreatic digest of casein 酪蛋白胰酶消化物 |
10.0 |
|
肉提取物 |
5.0 |
|
酵母粉 |
1.0 |
|
丙tong酸钠 |
10.0 |
|
L-甘氨酸 |
12.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
琼脂 |
20.0 |
|
pH 7.2±0.2@ 25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
为验证培养结果,可进一步使用兔血浆凝固酶(R21052,R21060),试剂盒DR0595,DR0850进行确认。
Baird-Parker RPF 琼脂基础 CM0961
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
Pancreatic digest of casein 酪蛋白胰酶消化物 |
10.0 |
|
肉提取物 |
5.0 |
|
酵母粉 |
1.0 |
|
丙tong酸钠 |
10.0 |
|
甘氨酸 |
12.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
琼脂 |
20.0 |
|
pH 7.2±0.2 @25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
RPF添加剂 SR0122A
|
成分 |
每瓶SR0122A含 |
每升培养基含 |
|
牛纤维蛋白原 |
375mg |
3.75g |
|
兔血浆 |
2.5ml |
25ml |
|
胰蛋白酶抑制剂 |
2.5mg |
25.0mg |
|
亚碲酸钾 |
2.5mg |
25.0mg |
甘露醇高盐琼脂 Mannitol Salt Agar等产品
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM1180B |
甘露醇高盐琼脂(Champan培养基) |
500g |
4.5L |
|
R453902 |
甘露醇高盐琼脂(EP/USP/JP/BP) |
500g |
4.5L |
|
CM0094C |
高盐肉汤片剂 |
100片 |
每片5ml |
|
CM0145B |
110号葡萄球菌培养基 |
500g |
3.3L |
甘露醇高盐琼脂(甘露醇盐琼脂)CM1180,原货号CM0085
对致病性葡萄球菌的分离培养基,除几种耐盐细菌外,大部分细菌都被抑制
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
`Lab-Lemco’粉(牛肉浸粉) |
1.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
甘露醇 |
10.0 |
|
氯化钠 |
75.0 |
|
酚红 |
0.025 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH 7.5±0.2 @25℃ |
|
*可根据标准所示性能进行调整
使用说明:
取111g培养基至1L蒸馏水中,煮沸至完全溶解,121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
产品描述:
甘露醇高盐琼脂被推荐用于牛奶,食品,等样品的凝固酶阳性葡萄球菌的检测和计数,Oxoid的甘露醇高盐琼脂已被用于肉类和鱼类的检测。
推测的凝固酶阳性的葡萄球菌产生亮黄色环的菌落,而非致病性葡萄球菌产生紫红色菌落环。
在甘露醇高盐琼脂中加入5% v/v的卵黄乳液SR0047C,可提高葡萄球菌的脂肪酶活性,再加上甘露醇发酵反应,使葡萄球菌被检测出来。
注意事项:
少数金黄色葡萄球jun会出现甘露醇延迟发酵状态,此时可将培养结果为阴性的培养基重新过夜孵育。
对金黄色葡萄球jun的进行确证必须获得该菌的凝固酶试验测试结果(可用Oxoid的试剂盒DR0595A)。
甘露醇高盐琼脂 R453902
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
Beaf Extract (牛肉浸粉) |
1.0 |
|
Casein Peptone(胰酪胨) |
5.0 |
|
Meat Peptone |
5.0 |
|
D-甘露醇 |
10.0 |
|
氯化钠 |
75.0 |
|
酚红 |
0.025 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH 7.4 ±0.2 @25℃ |
|
*可根据标准所示性能进行调整
高盐肉汤片剂 CM0094C
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
`Lab-Lemco’粉(牛肉浸粉) |
10.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
中性牛心脏组织 |
30.0 |
|
氯化钠 |
100.0 |
|
pH 7.6 @25℃ |
|
*可根据标准所示性能进行调整
使用说明:
将2片CM0094C加入到含有10ml蒸馏水的合适试管中,震荡5分钟,121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
从食品样品中分离金黄色葡萄球jun,先用蛋白胨水CM0009溶解样品,然后在CM0094C的试管中增菌培养,35℃下培养基24-48小时,然后再接种到甘露醇盐琼脂CM0085或110号葡萄球菌培养基CM0145的平板上,以获得单独的葡萄球菌菌落。
110号葡萄球菌培养基 CM0145
一种依靠耐盐,色素,甘露醇发酵及明胶液化反应的分离鉴定致病性葡萄球菌的选择性培养基
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
酵母粉 |
2.5 |
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
乳糖 |
2.0 |
|
甘露醇 |
10.0 |
|
氯化钠 |
75.0 |
|
磷酸氢二钾 |
5.0 |
|
明胶 |
30.0 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH 7.1±0.2 |
|
*可根据标准所示性能进行调整
Vogel-Johnson琼脂 Vogel-Johnson Agar
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM0641B |
Vogel-Johnson琼脂 |
500g |
8.2L |
|
SR0030J |
3.5%亚碲酸钾 |
10*2ml |
|
Vogel-Johnson琼脂 CM0641
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母粉 |
5.0 |
|
甘露醇 |
10.0 |
|
磷酸氢二钾 |
5.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
甘氨酸 |
10.0 |
|
酚红 |
0.025 |
|
琼脂 |
16.0 |
|
pH 7.2±0.2 @25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
使用说明:
取61g培养基至1L蒸馏水中,缓慢煮沸至完全溶解,121℃高压蒸汽灭菌15分钟,冷却至50℃,加入5.7ml的无菌3.5%亚碲酸钾溶液SR0030J(平均20ml是1%亚碲酸钾)
Giolitti-Cantoni 肉汤 Giolitti-Cantoni Broth
对食品中的金葡菌进行增菌培养
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM0523B |
Giolitti-Cantoni肉汤基础 |
500g |
9.2L |
|
SR0030J |
3.5%亚碲酸钾 |
10*2ml |
|
Giolitti-Cantoni肉汤基础 CM0523
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
`Lab-Lemco’ powder牛肉浸粉 |
5.0 |
|
酵母粉 |
5.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
甘露醇 |
20.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
甘氨酸 |
1.2 |
|
丙tong酸钠 |
3.0 |
|
pH 6.9±0.2 @25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
使用说明:
取54.2g至1L蒸馏水中,缓慢加热至溶解,分装19ml至20*200mm的试管中,121℃灭菌15分钟,迅速冷却后每个试管加入0.3ml的无菌3.5%亚碲酸钾溶液SR0030J。
CNA葡萄球菌/链球菌选择性琼脂 CNA Staph/Strep Selective Agar
用于培养葡萄球菌和链球菌的选择性培养基,琼脂基础使用CM0331B或者CM0271B
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM0331B |
哥伦比亚血琼脂基础 |
500g |
12.8L |
|
CM0271B |
2号血琼脂基础 |
500g |
12.5L |
|
SR0070E |
葡萄球菌/链球菌选择性添加剂 |
10小瓶 |
每小瓶500ml |
|
SR0176G |
改良CNA选择性添加剂 |
10小瓶 |
每小瓶2.5L |
葡萄球菌/链球菌选择性添加剂 SR0070E
|
成分 |
每瓶SR0070E含 |
每升培养基含 |
|
萘定酸 |
7.5mg |
15.0mg |
|
硫酸粘菌素 |
5.0mg |
10.0mg |
使用说明:
待含有5-7%的脱纤维马血SR0050的哥伦比亚血琼脂培养基冷却到50℃后,每500ml培养基中加入1小瓶SR0070E的溶解物。混匀倒平板。
35℃培养18小时,正常环境中,不要在二氧化碳培养箱中进行培养。
鉴定出来推定的葡萄球菌和链球菌需要进一步鉴定,可以使用Oxoid的葡萄球菌试剂盒DR0595A,链球菌试剂盒DR0585A。
改良CNA选择性添加剂 SR0176G
|
成分 |
每瓶SR0176G含 |
|
萘定酸 |
12.5mg |
|
硫酸粘菌素 |
18.75mg |
使用说明:
根据说明溶解1小瓶SR0176G,待含有5-7% 的脱纤维马血SR0050的哥伦比亚血琼脂培养基(或者2号血琼脂)冷却到50℃后,每2.5L培养基中加入1小瓶SR0167G的溶解物。混匀倒平板。
耐苯唑西林筛选琼脂(ORSA) Oxacillin Resistance Screening Agar(ORSA)
用于筛选临床样本中的耐苯唑西林的葡萄球菌
|
货号 |
产品描述 |
规格 |
可配制培养基 |
|
CM1008B |
耐苯唑西林筛选琼脂基础 |
500g |
4.8L |
|
SR0195E |
ORSAB选择性添加剂 |
10小瓶 |
每小瓶500ml |
耐苯唑西林筛选琼脂基础 CM1008
一种对常规的拭子样本中的耐甲氧西林金黄色葡萄球jun(MRSA)的筛选培养基
配方表:
|
成分* |
含量 g/L |
|
蛋白胨 |
11.8 |
|
酵母粉 |
9.0 |
|
甘露醇 |
10.0 |
|
氯化钠 |
55.0 |
|
氯化锂 |
5.0 |
|
Aniline Blue苯胺蓝 |
0.2 |
|
琼脂 |
12.5 |
|
pH 7.2±0.2 @25℃ |
|
*可自行调整以符合标准
ORSAB选择性添加剂 SR0195E
|
成分 |
每瓶SR0195E含 |
每升培养基含 |
|
多粘菌素B |
25000 IU |
50000 IU |
|
苯唑西林 |
1.0mg |
2.0mg |
使用说明:
取51.75g培养基至500ml蒸馏水中,缓慢加热煮沸至溶解,121℃灭菌15分钟,冷却至50℃后加入1小瓶已按照说明书溶解的SR0195E,混匀倒平板。
37℃培养24小时后,典型的MRSA菌落在无色培养基下显蓝色,更多该产品信息请见
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文献和实验(AATCC 100-1988),可用于抗菌滤料抑菌能力的定量分析。类似方法有《消毒技术规范》中的浸渍试验法。(2)试验过程 菌种为金黄色葡萄球菌26111(4),菌液浓度为106个/ml。将直径为4.8cm的A、B、C、D四种滤料圆片分别堆放到四个广口瓶(容量250ml,带旋盖)中,在每个瓶中分别加入20ml左右的菌液(菌液量应能刚好被滤料吸收完全而没有剩余,保证其与滤料的充分作用),用灭菌玻璃棒确保均匀分布。尽快(0接触时间)往广口瓶中添加100ml的PBS溶液(0.03mol/L,PH7.2
.1 组氨酸—生物素平板成分:琼脂粉 15 g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20 mL20%葡萄糖 20 mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5 g / 100 mL) 10 mL灭菌 0.5 mmol/L生物素溶液 6 mL配制:高压灭菌琼脂和水后,将灭菌 20% 葡萄糖,V-B 培养基和组氨酸溶液加进热的琼脂溶液中。待溶液稍为冷却后,加入灭菌生物素,混匀,浇制平板。6.10.2 氨苄青霉素平板和氨苄青霉素/四环素平板 成分:琼脂粉 15 g 蒸馏水 940 mL
, Stuttgart, Germany) 。 ( 9 ) 成像板(BAS-SR 2025,Fujifilm,Japan) 。 ( 10 ) 磷屏显像仪(BAS-Reader-5000,Fujifilm) 。4. 注释 ( 1 ) 我们建议在激酶中加入甘油 [ 终浓度为 20% ( V/V)] 后保存在 -80°C,或将激酶在合适的缓冲液环境中冷冻干燥后保存在 -80°C,使用前,冻干的激酶要先用 ddH2O 溶解。 ( 2 ) 在进行基于芯片的激酶实验前,我们建议对激酶制备物进行胶内活性
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