BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱

碧云天的BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱，即BeyoDesalt™ G-25 Midi Desalting Column，是一种简单、快速、高效地使用Beyodex™ G-25 Medium (G-25 M)基质分离大分子量物质与小分子量物质的预包装即用型层析柱，俗称脱盐柱，主要用于去除蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。本脱盐柱使用的填料为Beyodex™ G-25 Medium，填料粒径为70-250μm，可分离分子量>5kDa的蛋白质或其它大分子样品，柱床体积为5.3ml，建议上样量为0.5-1.5ml，本产品的功能和使用方法与Cytiva的PD MidiTrap G-25基本一致，适用于重力法或离心法。

本产品采用的是Beyodex™ G-25 Medium基质，该基质是葡聚糖(Dextran)经环氧 氯丙烷交联剂通过醚键交联形成的三维网状筛孔结构的高分子聚合物，与Sephadex G-25 Medium的性能基本一致。本产品用于分离样品时，体积较大的大分子不能进入基质网状筛孔而被阻隔在基质凝胶之外，随着流动溶液沿着基质凝胶颗粒间的缝隙移动，下移速度较快，先被洗脱出柱；体积较小的分子或离子可以进入基质网状筛孔从而进入凝胶内部，随着流动溶液在凝胶颗粒的网孔内移动，因此小分子量物质在基质内停留时间更长，下移速度较慢，后被洗脱出柱，这种分离纯化方式被称为尺寸排阻层析(Size-exclusion chromatography, SEC)，也常被叫做分子筛层析(Molecular sieve chromatography, MSC)或凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography, GFC) [1-2] (图1)。

图1. 碧云天BeyoDesalt™脱盐柱的工作原理图。

本产品的基本信息如下表:

基质(Matrix)	Beyodex™ G-25 Medium, cross-linked dextran
填料粒径(Bead size)	70-250μm
分离范围(Exclusion limit)	Mw > 5kDa (Mw: molecular weight, also mentioned as Mr: relative molecular mass)
建议上样量(Recommended sample volume)	0.5-1.5ml
样品稀释倍数(Sample dilution)	1.3-3
柱床体积(Column volume, CV)	5.3ml
柱床尺寸(Column dimensions)	1.3×6.6cm
柱床内径(Column i.d.)	12.7mm
化学稳定性(Chemical stability)	All commonly used buffers; Avoid oxidizing agents
pH稳定性(pH stability)	pH2-13
使用方法(Operation)	Gravity or Spin
保存条件(Storage)	20% ethanol at 4-30ºC

碧云天提供多种类型的脱盐柱，不同类型脱盐柱的比较和选择请参见下表：

Product Name		BeyoDesalt™
Classification		Multi Spin (96 well)	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Diagram
Matrix		Beyodex™ G-25 M Beyorose™ 6FF	G-25 M 6FF	G-10 G-25 M 6FF	G-10 G-25 M 6FF	G-25 M 6FF	G-25 SF 6FF	G-25 F 6FF
Resolution		★★★					★★★★★	★★★★
Spin***	Sample volume	70-130μl		0.2-0.5ml	0.75-1.5ml	1.75-2.5ml	Not Applicable
	Elution volume	70-130μl		0.2-0.5ml	0.75-1.5ml	1.75-2.5ml
	Dilution factor	1
Gravity	Sample volume	Not Applicable		0.1-0.3ml* 0.1-0.5ml**	0.4-1ml* 0.5-1.5ml**	1-2.5ml
	Elution volume			1ml	2ml	3.5ml
	Dilution factor			2-10	1.3-3	1.5-3.5
Syringe	Sample volume	Not Applicable		Not Applicable			0.25-1.5ml	Not Applicable
	Elution volume						1-2ml
	Dilution factor						1.3-4
AKTA System	Sample volume	Not Applicable		Not Applicable			0.25-1.5ml	2-20ml
	Elution volume						1-2ml	10-30ml
	Dilution factor						1.3-4	1.5-5
Number of columns used in series		Not Applicable					1-5 columns

* Beyodex™ G-10; ** Beyodex™ G-25, Beyorose™ 6FF; *** Beyodex™ G-10 Not Applicable for Spin protocol.

碧云天提供3种基质类型的脱盐柱，不同类型基质截留分子量(Molecular Weight Cut-off, MWCO)的比较和选择请参见下表：

Matrix	MCWO	Catalog Number
		Multi Spin	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Beyodex™ G-10	>0.7kDa	/	/	P2605	P2607	/	/	/
Beyodex™ G-25	>5kDa	P2611	P2613	P2615	P2617	P2619	P2621	P2623
Beyorose™ 6FF	>400kDa	P2625	P2627	P2629	P2631	P2633	P2635	P2637

碧云天BeyoDesalt™ G-25系列脱盐柱7种型号的比较和选择请参见下表：

Serial Name	BeyoDesalt™ G-25
Classification	Multi Spin (96 well)	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Cat. No.	P2611	P2613	P2615	P2617	P2619	P2621	P2623
Beads size	70-250μm					40-70μm	40-140μm
Volume of resin	500μl	500μl	2.1ml	5.3ml	8.3ml	5ml	70ml
Packed bed dimensions	/	/	0.9×6.3cm	1.3×6.6cm	1.6×8.3cm	1.6×2.5cm	2.6×18cm
Column volume	800μl	800μl	5ml	8.5ml	13.5ml	5ml	70ml
Maximum sample volume	130μl	130μl	0.5ml	1.5ml	2.5ml	1.5ml	20ml
Recovery	70-90%	70-90%	70-95%	70-95%	70-95%	95%	95%
Desalting capacity	>85%		>90%			>95%
Plate/column material	polypropylene
Storage solution	20% ethanol
Storage temperature	4-30ºC

本脱盐柱应用广泛，可以有效去除样品中的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。可用于对蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品进行脱盐，完成溶液置换；去除培养基中的酚红，便于后续通过离子交换层析纯化蛋白质或核酸；去除DNA样本中的单核苷酸，便于后续DNA测序；去除样本中的小分子量标记物；通过分离大分子量物质与小分子量物质终止两者之间的反应；移除蛋白酶的产物、辅助因子或抑制剂；去除核酸标记反应中多余的放射性标记物；去除体外生物素标记反应中多余的生物素(D-Biotin)。采用重力法分离1.5ml样品的效果图参见图2。

图2. 碧云天的BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱(P2617)重力法分离大分子量物质与小分子量物质的效果图。平衡、洗脱溶液均为10mM Tris pH7.4, 50mM NaCl，加入1.5ml样品(2mg/ml BSA in 10mM Tris pH7.4, 500mM NaCl)，实线A280nm代表紫外吸收值监测大分子量物质(BSA)，箭头表示BSA在1.25-3.75ml处被洗脱下来；虚线代表电导读数监测小分子量物质(NaCl)。实验结果显示BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱可以有效分离大分子量物质与小分子量物质。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本脱盐柱显著优于传统半透膜透析方法。①分离速度快、节省时间：脱盐柱可以对样品进行快速分离，处理一个样品通常只需要5分钟，而半透膜透析至少需要6小时；②适合小体积操作、样品回收率高：脱盐柱可以有效处理0.5-1.5ml的小体积样品，回收率通常>90%，但是半透膜透析后释放样品时会有部分样品粘附在半透膜上，无法完全回收，因此不适合小体积样品；③节省溶液：半透膜透析时需要大量的缓冲液，但是脱盐柱仅需20ml缓冲液即可完成实验。

本脱盐柱有重力法和离心法两种使用方式，可根据实验需求进行选择(图3)。①重力法：样品利用重力流经脱盐柱，操作简单，设备要求低，样品回收率比离心法稍高，但样品会发生约1.4倍的稀释；②离心法：样品利用离心力流经脱盐柱，样品回收率比重力法稍低，但样品不会被稀释。

图3. 碧云天BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱(P2617)的重力法和离心法两种使用方法示意图。重力法中的脱盐柱上端可通过Syringe Connector (针筒型层析柱接头) (FC007)与30ml注射器空柱管(FS830)连接用于柱平衡(图B)，或下端可通过Female Luer Connector (双母鲁尔接头) (FC009)与Luer Syringe (鲁尔接口注射器) (FS701-FS750)组装后用于柱平衡(图C)，或在下端连接20ml鲁尔接口注射器，上端连接20ml注射器空柱管用于柱平衡(图D)。离心法中脱盐柱需要与6ml层析柱转50ml离心管适配器(FSA011)及50ml收集管(FTUB550)组装后使用(图E)。注射器法中脱盐柱上端需要Syringe Connector (针筒型层析柱接头) (FC007)与20ml注射器空柱管(FS820)连接，下端需要Female Luer Connector (双母鲁尔接头) (FC009)与Luer Syringe (鲁尔接口注射器) (FS701-FS750)组装后使用(图C)。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
P2617-5pcs	BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱	5个
P2617-20pcs	BeyoDesalt™ G-25 Midi脱盐柱	20个
-	说明书	1份

保存条件：

4ºC保存，两年有效。室温保存，至少一个月有效。

注意事项：

为防止交叉污染，本产品建议一次性使用。

脱盐柱反复使用，可能会导致样品回收率降低。

请勿冷冻保存本产品，冻结会导致脱盐柱的基质碎裂。

保存和纯化过程中应始终保持基质湿润，避免气泡进入脱盐柱中。

建议在缓冲液中加入25mM NaCl，以防止潜在的离子间相互作用。如不能使用NaCl，可以尝试加入100mM乙酸铵(NH₄Ac)或100mM碳酸氢铵(NH₄HCO₃)挥发性缓冲液。

当缓冲液中盐浓度>1M时，疏水性物质在柱子内的停留时间可能会延长或与基质结合。

当缓冲液中含有>1.5M (NH₄)₂SO₄时，脱盐柱基质可能会发生收缩。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。