针式滤器（水试剂过滤除杂专用，无菌）

细胞培养注意事项（入门级）

，高压灭菌之后，再去内毒素。去内毒素方法很多，最简单可以放在烘箱180度3小时。或者过去内毒素的柱子后，高压灭菌。第二，各种溶液灭菌：抗生素用去内毒素水配制后，直接过滤除菌（过0.22u滤头）。可以用一次性无菌注射器过一次性0.22u滤头。现在用的培养液，如果是商业化液体培养基，不用处理。如果是粉末，需要用去内毒素水在生物安全柜（或超净工作台）进行配制，再过滤除菌。可以先配浓缩液（如10×），过滤除菌后。再用灭菌去内毒素水稀释成1×培养液。第三，完全培养液的配制：培养液加上合适比例的血清即可。但血清

细胞污染防治的一些心得

都可以保证无菌。如果试剂需要自己用干粉配制，那么在配制中需要严格按无菌操作进行。另外每次试剂配制量不宜过多，比如完全培养基建议以一到两周内用完为宜。试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次，减少污染的可能性。如果所用移液器吸头是散装的，则注意在将吸头装入吸头盒时需要带手套，因为灭菌时无法完全去除吸头上可能粘附的油脂和其他杂质。 其次，安全柜每次使用前需要紫外照射30min灭菌，然后通风5min以上保证换气到位。每次处理细胞前应将实验需要的各种试剂、耗材备齐，尽量减少细胞处理过程中的来回

尘螨变应原的制备

器(Seitzfilter)无菌过滤，校正pH值为7．0，4℃下保存备用。     6)尘螨性变应原溶液的标准化：螨的重量与提取液之比为l：50。     (1)总氮单位：变应原溶液含氮量与效价是成正比的，一般用凯氏定氮法检测最为标准。目前螨性疫苗注射液有两种规格，即12ug／ml(1：5 000)和6ug／ml(1：10 000)。     (2)蛋白氮单位：由于变应原中的有效成分主要是蛋白质，故测定其含量是表达其效价的方法之一。目前常用的方法是先把溶液的非蛋白氮除去(如磷钨酸沉淀)，然后用微量凯氏