土壤DNA专用保存液1

提取土壤总DNA的几种方法

一、DNA 提取　 SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1 g 土壤，放入研钵中，倒入适量的液氮，立即研磨；再倒入适量的液氮，研磨，重复3 次，使土壤颗粒研成粉末； 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ，0.1 mol/L  EDTA [pH 8.0 ] ，0.1 mol/L Tris-HCl [pH 8.0 ] ，1.5 mol/L  NaCl ，1.0 % CTAB) 和50μl蛋白酶K(10 g/L  ) 与5 g 土壤置于50 ml

土壤DNA 纯化难点——腐殖质

土壤，是由一层层厚度各异的矿物质成分所组成大自然主体。土壤和母质层的区别表现在于形态、物理特性、化学特性以及矿物学特性等方面。由于地壳、水蒸气、大气和生物圈的相互作用，土层有别于母质层。它是矿物和有机物的混合组成部分，存在着固体，气体和液体状态。疏松的土壤微粒组合起来，形成充满间隙的土壤的形式。这些孔隙中含有溶解溶液（液体）和空气（气体），因此，土壤通常被视为有多种状态 。 提取土壤中微生物、动植物遗体等的DNA是在分子水平上研究生态、环境保护与修复及菌种筛选等的基础。土壤的成分包括矿物

土壤总DNA的几种提取方法

注射器，用注射器推杆将灭过菌的玻璃棉推到注射器筒底部，使其厚度约为0.5cm，然后向注射器筒中加入TE缓冲液浸透的葡聚糖凝胶G-200，制成简式离心层析柱，再置于10ml的离心管中，于高速冷冻离心机上以3000r/min离心20min，去除葡聚糖凝胶G-200中的TE缓冲液，将离心层析柱再置于另一10ml的离心管中，在离心层析柱顶部加入50μl粗土壤DNA，以10 min为周期于3000r/min离心，分别收集层析液。层析液浓缩至50μl二、DNA的琼脂糖凝胶电泳证明存在DNA。三、DNA 的纯度