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文献和实验1. 前言 鉴定植物磷酸化蛋白质的实验方法主要有以下 5 种 :① 放射性同位素 32P 或 33P 标记 [1];② 不同蛋白质电泳迁移率的检测 [ 2,3] ;③ 磷酰氨基酸特异性抗体的免疫分析[ 3,4];④ 磷酸化诱导增加的完整蛋白质质量的质谱分析[5,6] ;⑤ 蛋白质水解后得到的磷酸肽的鉴定及序列分析 [ 7~9] 。最近已经报道了以上所列的此种技术用于检测植物类囊体膜上磷酸化蛋白的实验方法[ 10] 。因此,本章将不再进一步讨论以上 ①~④ 的实验方法,重点讨论最有效
咪咪土拨鼠 各位大侠好, 我是外科学的医学生,现在在实验,提的问题很弱智,大家勿拍。 我做目的蛋白的western, 发现其在处理组有明显的分子量漂移,初步推测其为磷酸化改变---因为再同时加了一种激酶的抑制剂后,这种漂移消失了。 但问题是,怎么证明它确实是磷酸化呢? 我查了查文献,目前常用的是放射性P实验和质谱分析什么的,但这对于我们的条件和经费来说,似乎不太可能。 我的问题: 1. 是否可以在用
、分子排阻色谱、不对称流场分离技术等。为了改进分离效率和特异性,新的方法也层出不穷,包括:微流体过滤、无接触分选、免疫亲和富集等。基于物理特性鉴定外泌体的方法有:显微镜技术包括扫描电镜技术(SEM)、透射电镜技术(TEM)、冷冻电镜 (cryo-EM)、原子力显微镜(AFM);动态光散射 (DLS);纳米颗粒示踪分析 (NTA);可调电阻脉冲传感 (TRPS);以及单一 EV 分析法 (SEA)外泌体显微成像. a) SEM;b) TEM; c) cryo-EM; d) AFM from Shao
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