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500 mL
产品规格:500 mL
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文献和实验胶质细胞层的上面然后运用旋转摇床以260rpm 18小时摇荡分离,通过30μm的尼龙网过滤,然后细胞悬液接种到含无血清培养基的培养皿中。培养基成分:DMEM-Ham‘s F-12混合物(1:1),10mM HEPES,0.1%牛血清蛋白,25μg/mL 人铁转蛋白,30nM三碘甲状腺氨酸,20nM氢化可的松,20nM黄体酮,10nM 维生素H,5μg /mL胰岛素,16μg/mL腐胺,30nM硒,50U/mL 青霉素和50μg/mL 链霉素,还含有2.5ng/mL 血小板源性生长因子AA和2.5ng/mL
丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
基的离心管中,轻轻震荡混匀后,放置于 37℃ 培养箱中解离 1 h。每隔15min 轻轻震荡或吹打混匀一次。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 450g 离心 5min。 8、若细胞沉淀有明显的红色,则将细胞重悬于 5ml 的红细胞裂解液中,冰上孵育 10min 使红细胞裂解。 9、向细胞悬液中加入 5ml DMEM/F12 冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入
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