大鼠骨质疏松模型

大鼠骨质疏松模型的制备方法及实验流程

1. 卵巢切除术（OVX）模型

1.1 实验动物选择

动物选择：选择6-8周龄的雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠。

适应性饲养：适应性饲养1周，自由进食饮水。

1.2 手术操作

麻醉：使用适当的麻醉剂（如戊巴bi妥钠或异氟烷）对动物进行麻醉。

手术步骤：

将大鼠腰背部剃毛，碘伏消毒。

在脊柱两侧1cm处各作一个纵向切口（长度0.5cm），钝性分离肌肉层，找到包裹卵巢的脂肪垫。

结扎输卵管-子宫连接处，完整切除卵巢。

逐层缝合肌肉与皮肤，碘伏消毒，单笼常规饲喂。

对照组：对照组动物进行假手术，仅暴露卵巢但不切除。

1.3 术后护理

术后处理：术后3天，每只大鼠每天注射40万单位青霉素，防止感染。

1.4 模型验证与评估

骨结构观察：通过Micro-CT（计算机断层扫描）观察骨结构，可选择性呈现骨密度（BMD）、骨体积/总体积（BV/TV）、骨表面积/骨体积（BS/BV）、骨表面积/总体积（BS/TV），骨小梁数目（Tb.N）、以及骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁间隔（Tb.sp）等。

组织学检查：取各组大鼠胫骨标本，固定24-48小时，再经脱钙，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，纵向石蜡包埋，5μm连续切片，常规HE染色。对照组胫骨骨小梁密集，相互交织成网状；模型组骨小梁数目明显减少，骨小梁变薄，呈断裂状。