watson113-744C200 µL 大口径枪头，透明，

ELISPOT标准操作程序（protocol）

第一天：ELISPOT包被程序，提供两种方案供选择（严格注意无菌操作）一、传统酒精预湿包被程序该方案中，需经过：70%乙醇预湿PVDF膜、无菌去离子水洗涤去除乙醇、拍干，最后，加入已稀释好的包被抗体到各实验孔完成包被操作。具体操作如下：1、实验卡片填写：设计好试验，把每个孔要加入的内容做成卡片，到时候就会从容很多。2、每孔加入15μL 70%的乙醇预湿。注意：（1）未润湿PVDF膜是洁白、不透明的，经乙醇润湿后，颜色变暗，呈半透明状，很容易观察二者的区别。（2）加乙醇时，枪头应该靠在孔壁接近孔

基因枪气体输出强度对转染效果影响

） 7.把洋葱表皮切成适当的大小（3 cm×3 cm×2 mm），并在使用前消毒。 8.把10µL的DNA样品溶液等分倒入样品装载孔。 9.使用3 cm的目标间隔件（将枪头固定在样品上方3 cm）对洋葱进行轰击。 10.培育样品2天，在显微镜下观察结果。           图一.在不同的旋钮圈数设置（气流强度）和气体压力设置下，两次轰击洋葱样品所得到的结果

SDS-PAGE Gels（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳）

Composition29 ml45 mlComponent5%7.5%10% 5%7.5%10%water16.113.611.7 24.1520.417.55Soln. B7.57.57.5 11.2511.2511.25SDS0.30.30.3 0.450.450.45Soln A57.510 7.511.2515TEMED (µl)151515 202020persulfate (µl)150150150 200200200 Reducing Buffer (1:1)Reducing Buffer (1/3 X