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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
USMC
- 库存:
10
- 供应商:
晶风生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
详见説明
- 物种来源:
人,小鼠,大鼠等物种
- 细胞形态:
上皮
- 器官来源:
USMC
- 运输方式:
顺丰速运
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁或悬浮
- 规格:
1×10^6cells/T25培养瓶
雅吉生物作为专注于细胞相关技术的高科技生命科学和生物技术领域企业,我们拥有完善的细胞资源库和先进的检测技术,能够为广大科研工作者提供准确优质的细胞。 我们的细胞资源库种类齐全,广受国内众多重点实验室和科研人员的信赖与好评。选择雅吉生物,就是选择专业与信赖。我们将竭诚为您服务,助力您的科研成果更上一层楼!欢迎选购我们的细胞产品,我们将为您提供优质的产品和服务。
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培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(较好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。

USMC大鼠血管平滑肌细胞价格细胞培养步骤
a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养。
贴壁细胞传代步骤如下:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,然后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
USMC大鼠血管平滑肌细胞价格悬浮细胞传代步骤日下:
1、半换液法
半换液处理,竖着培养瓶在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后补给3ml的完全培养基,如果培养基变色慢,可直接加500ul左右FBS,传代的时候可以直接补给5ml培养基 分两个培养瓶培养,一般这样传代3次左右可以离心传代一次,去掉死细胞。
2、离心换液法
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
b、细胞冻存:
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;
3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
C、细胞复苏:
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
USMC大鼠血管平滑肌细胞价格注意事项:有些细胞贴壁不牢,在运输过程中容易发生细胞脱落,这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
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文献和实验培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
,平滑肌细胞胞质呈现较强棕红色荧光。 六、注意事项 1、为了保持细胞活力,大鼠适宜采用药物麻醉后取材。大鼠应严格消毒,无菌解剖,打开胸腔后换取另一套器械获取主动脉血管。 2、注意尽可能洗涤净血管内的残血,避免血细胞及某些血清成分对细胞贴壁的影响。 3、血管由内膜层,中膜层和外膜层三层膜结构构成,而血管平滑肌细胞主要分布在血管中膜层,采用机械刮除法去掉内膜后再获取中膜以分离细胞,从血管内膜面刮下的细胞可以收集计数,培养主动脉血管内皮细胞。 4、酶消化法分离血管平滑肌细胞,酶消化过度容易损伤细胞,影响
性高血压患者饮食钙摄入量较正常人低,其血清Ca + 和肾素水平也低,对这些患者长期补充钙可使血压降低,并能对抗高盐所致的升压效应。实验也证明,减少饮食中的钙,可使自发高血压大鼠(SHR)血压明显升高;相反,如增加钙摄入量,可延缓SHR幼鼠血压的升高,并使SHR成年鼠血压降低。钙的降压机制可能是:①稳定细胞膜结构,控制膜离子通透性,使Ca + 不致大量进入细胞内;②钙与钙调蛋白结合,激活细胞膜钙泵,增加钙的外流,使细胞内钙浓度降低。防止血管平滑肌细胞内Ca
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