免费代测|Chicken末端脱氧核糖核酸转移酶(TDT)EL

教您正确选择逆转录酶，适用 6 种不同应用

酸，而 AMV 逆转录酶表现出更高的错误率。 逆转录酶可展现出末端核苷酸转移酶（TdT）活性， 对于 RNA 测序（RNA-Seq），TdT 活性可以诱导逆转录酶特异性地向 cDNA3′ 末端加入一系列 Cs。在高浓度镁和/或锰离子条件下的 cDNA 合成期间及合成后阶段，这种类型的 TdT 活性会被触发。结合特殊设计的具有 3’Gs（称为模板切换寡核苷酸）的 DNA 寡核苷酸，TdT 活性可以特异性地修饰 3’cDNA 末端和 5′ RNA 末端。这些序列修饰的实例包括引入用于随后 cDNA 合成

原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡

的3-OH末端。而TdT具有构型非特异性与3´-OH端部位的碱基结合的功能。因此，在末端脱氧核糖核酸转移酶或DNA多聚酶介导下，可使生物素化的dUTP标记至DNA断裂后形成的3´-OH末端，借生物素和亲和素的特异结合，使过氧化物酶连接至DNA断点，最后加入底物显色，可在荧光显微镜下观察，计数着色的凋亡细胞。

[分享]PCR扩增产物的分析方法

较 困难，即使固定上，也会影响杂交。这就是需要将寡 核苷酸探针用末端转移酶加polydT尾后，UV线照射固 定。因为UV可激活胸腺嘧啶，使其与尼龙膜上的氨基 共价结合，使探针间接地牢固地固定在尼龙膜上。这 种加尾固定的探针不影响杂交。但这种杂交对固定探 针的要求是，在同一条件下与PCR产物的杂交必须是特 异的。通过选择探针的合适长度，G+C含量或通过改变 探针的固定可达到特异性的要求。这种固定的探针可 用于检测人类基因的突变，也可用来检测病原微生 物。　　(1)加尾反应是用脱氧核糖核酸末端转移酶