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48T
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文献和实验, et al., British Journal of Pharmacology, 2025) AAV9血清型+COL1A2启动子 COL1A2基因编码I型胶原蛋白的α2前体链。Ⅰ型胶原蛋白是一种纤维形成胶原蛋白,存在于大多数结缔组织中。成纤维细胞是Ⅰ型胶原蛋白的主要生产者,其COL1A2表达量较高。在很多研究中,COL1A2启动子被用作纤维细胞特异性启动子。
1、将切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中(可不要动它),在手术完成时将标本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室;2、在超净台中将标本放入培养皿中,加入α-MEM洗涤;3、获得组织切开,仔细辨认于关节反折处及增生的白色光滑的滑膜组织,附于关节软骨面的增生的血管翳也为滑膜组织(可作另一管消化),仔细剔除脂肪组织,用α-MEM洗二次(以去除红细胞),放在小青瓶中用解剖剪锐性切碎4、用双倍获得组织的体积含有4mg/mlⅠ型胶原酶的α-MEM消化37℃孵育120分钟(在此期间
肌细胞的纯度几乎99%。结论:该方法易行、可靠、在短期内可获得大量高纯度膀胱平滑肌细胞。二、材料及方法 1、试剂及标本成同龄雄性新西兰白兔2只,体重约2.5~3k(购于南京军区南京总医院动物实验中心),一只为正常成年雄性新西兰白兔,一只为膀胱出口不全梗阻8周成年雄性新西兰白兔。DMEM、Ⅱ型胶原酶及α-肌动蛋白抗体(α-actin)购于北京华美公司;胎牛血清购于杭州四季青公司;胰蛋白酶购于南京生兴公司。2、 膀胱平滑肌细胞酶法分离肌注盐酸氯胺酮200mg及氟哌利多5mg麻醉,待兔进入麻醉状态后消毒,下腹
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