免费代测|Porcine晶状体蛋白αB(CRYαB)ELIS

新型纳米孔测序法（nanopore sequencing）

of California Santa Cruz, UCSC）的 Deamer和哈佛大学（Harvard University）的George Church都不约而同地提出一个构想：如果DNA分子 或者RNA分子也能堵塞某个通道，那么应该可以运用上述方法来检测电流。接下来，Deamer和Branton等 人证明了单链DNA和RNA分子能通过蛋白质组成的孔道，并且能检测到它们通过这种纳米级孔道时所造成 的电流改变（图8a）。他们使用的孔道蛋白是金黄色葡萄球菌α溶血素（Staphylococcus aureus toxin

新型纳米孔测序法实现简单快速进行DNA测序

)和脱氧嘧啶寡聚物(deoxypyrimidine oligomer)引起的电流改变差别并不大，只有不足5%。而 且这种电流改变差异是由10~15个核苷酸(占据了α溶血素蛋白的跨膜区)引起的，它无法区别单个核苷酸 引起的电流改变之间的差异(图a)。 (a)借助核酸链堵塞纳米孔时引起的电流强度改变来测序。图左侧是典型的电流强度图，从图中可见，纳米孔通 道通畅时(右上图)和被DNA链堵塞时(右下图)的电流强度是有明显区别的，但是无法区分堵塞纳米孔通道的 12bp核苷酸的组成。(b)核酸外切

【专题讨论】蛋白常用lysis buffer组成与作用详谈

是去垢的作用； PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride，也称Phenylmethylsulfonyl fluoride或α-Toluenesulfonyl fluoride。中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S，分子量为174.19。可抑制丝氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin)，也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶。有效浓度为0.1-1mM。难溶于水，且在水溶液中非常不稳