Human IL-8 ELISA Kit（人白介素8）ELI

产品中文名：人白细胞介素8(IL-8)酶联免疫吸附测定试剂盒

指标别名：CXCL8; AMCF-I; GCP1; K60; LECT; LUCT; LYNAP; MDNCF; MONAP; NAF; NAP1; SCYB8; TSG1; B-ENAP; Neutrophil-Activating Protein 1; Granulocyte Chemotactic Protein 1

指标简介：白细胞介素8（IL-8）是一种由巨噬细胞和其他细胞类型如上皮细胞、气道平滑肌细胞和内皮细胞产生的趋化因子。内皮细胞将IL-8储存在它们的储存囊中，即Weibel-Palade体。白细胞介素8（IL-8）由CXCL8基因编码。IL-8最初以99个氨基酸的前体肽产生，然后经过裂解产生几种活性IL-8异构体。在培养中，72个氨基酸的肽是巨噬细胞分泌的主要形式.表面膜上有许多能够结合IL-8的受体；最常研究的类型是G蛋白偶联的蛇形受体CXCR1和CXCR2。这两种受体的表达和对IL-8的亲和力不同（CXCR1 > CXCR2）。通过一连串的生化反应，IL-8被分泌出来，是先天免疫系统反应中免疫反应的一个重要媒介。

检测范围：7.8–500pg/ml

灵敏度：＜1.42pg/ml

精密度：板内变异系数均＜9%，板间变异系数均＜10%

保存温度：4℃

有效期：6 个月

检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒提供的酶标板已包被捕获抗体，实验时将待检样品（或标准品）加入酶标板反应孔中，捕获抗体结合目的蛋白。加入生物素标记检测抗体与目的蛋白结合，再加入 SABC 与标记抗体结合，形成捕获抗体-目的蛋白-检测抗体-SABC 免疫复合物，游离成分均被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在 450nm 波长处检测吸光度(OD)，目的蛋白浓度与 OD450 值之间呈正相关，通过绘制标准曲线计算出样品中目的蛋白的浓度。

样品的收集和保存：

1、血清：全血样品于室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 4℃，1,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或将上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

2、血浆：用 EDTA 或肝素钠抗凝管采集全血样品，采集后 30 分钟内置于 4℃冰箱，1,000×g 离心 15分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

3、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01mol/L， pH=7.4) 清洗组织，去除残留血液，冰上切割组织后称重。按组织重量(g): PBS 体积(ml) =1:9 的比例，加入 9 倍体积的 PBS（比如 1g 的组织样品加入 9ml 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录），加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎以充分匀浆。最后将匀浆液于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测（如需要可取部分上清进行 BCA 蛋白定量）。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

4、细胞裂解液：贴壁细胞用预冷的 PBS 轻轻清洗，胰蛋白酶消化，1,000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集到的细胞用预冷的 PBS 洗涤 3 次。PBS 稀释细胞悬液，细胞浓度达到10^6个/ml 左右。通过反复冻融或超声破碎使细胞裂解。4℃，3,000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。或取上清置于≤ -20℃冷冻保存，避免反复冻融。

5、细胞培养上清或其他生物体液：收集液体后于 4℃，3000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测。样本处理相关试剂推荐：PBS 缓冲液（货号：U21-259B），0.25%胰蛋白酶-EDTA 消化液（货号：U31-323C），0.25%胰蛋白酶消化液（货号：U31-324C）。

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