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48T
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文献和实验【进展|热点】Nature Immunology:骨髓基质细胞通过细胞间接触分泌SDF-1
重要,在骨髓中,骨髓基质细胞分泌CXCL12构成其主要来源。在骨髓造血微环境中,成骨细胞、其前体间充质干细胞、高表达CXCL12的网状细胞构成了基质细胞的主要细胞组分。间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)高表答间隙连接蛋白Connexin-43和Connexin-45。本研究发现,骨髓基质细胞通过与间隙连接蛋白Connexin-43和Connexin-45介导的细胞间接触模式分泌功能型CXCL12。阻断间隙连接可破坏CXCL12的分泌和小鼠淋巴细胞向骨髓归巢,纯化的CD
工程化小细胞外囊泡如何递送CAR mRNA?从靶向CD206到肺部原位生成CAR-M
mRNA装载 系统采用改造自EXOtic体系的L7Ae-C/D box机制:将RNA结合蛋白L7Ae与sEV膜蛋白CD63融合,并在CAR mRNA的3'非翻译区加入C/D box序列。两者特异结合,将CAR mRNA富集进入sEV。 qPCR结果显示,每个sEV平均装载约 693个CAR mRNA拷贝。研究还显示,L7Ae与C/D box需要共同存在,才能实现高效装载。 2.3 Cx43 S368A:促进胞质递送 系统加入连接蛋白Cx43突变体S368A,促进sEV与靶细胞融合或内容物释放,从而帮助
由于本人刚刚进入实验室,没有任何经验,不知道各位大哥能否给于指导,告知具体的实验注意点。谢谢各位大侠 Cx43、Cx40蛋白表达的测定 2.6.1血管组织的匀浆 取血管标本100mg置玻璃匀浆器中,按100mg/ml的比例加入裂解缓冲液,4℃下手工碾磨10-15分钟至肉眼看不到组织碎片,置离心管中于4℃低温离心机以14000ram离心15分钟,取上清液分装保存在-70℃深低温冰箱备用。 2.6.2 蛋白浓度的测定 用Bradford 比色法测定,分别在两组微量离心管中各加入
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