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48T
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文献和实验【进展|热点】Nature Immunology:骨髓基质细胞通过细胞间接触分泌SDF-1
重要,在骨髓中,骨髓基质细胞分泌CXCL12构成其主要来源。在骨髓造血微环境中,成骨细胞、其前体间充质干细胞、高表达CXCL12的网状细胞构成了基质细胞的主要细胞组分。间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)高表答间隙连接蛋白Connexin-43和Connexin-45。本研究发现,骨髓基质细胞通过与间隙连接蛋白Connexin-43和Connexin-45介导的细胞间接触模式分泌功能型CXCL12。阻断间隙连接可破坏CXCL12的分泌和小鼠淋巴细胞向骨髓归巢,纯化的CD
由于本人刚刚进入实验室,没有任何经验,不知道各位大哥能否给于指导,告知具体的实验注意点。谢谢各位大侠 Cx43、Cx40蛋白表达的测定 2.6.1血管组织的匀浆 取血管标本100mg置玻璃匀浆器中,按100mg/ml的比例加入裂解缓冲液,4℃下手工碾磨10-15分钟至肉眼看不到组织碎片,置离心管中于4℃低温离心机以14000ram离心15分钟,取上清液分装保存在-70℃深低温冰箱备用。 2.6.2 蛋白浓度的测定 用Bradford 比色法测定,分别在两组微量离心管中各加入
试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5----------- 1:500(4) 细胞角蛋白12(K12)---兔多克隆J7-------------- 1:2002. 二抗;(1) 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----
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