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- 文献和实验
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48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
Human磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
Human磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)ELISA Kit5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验RAT/MOUSE GROWTH HORMONE ELISA KIT
实验原理 This assay is a Sandwich ELISA based, sequentially, on: 1) capture of rat or mouse Growth Hormone molecules from samples to the wells of a microtiter plate coated by a pre-titered amount of anti-Growth Hormone
PI3K ― Akt 信号通路PI3K是一个复杂的大家族,根据其结构可分为3类:I型、Ⅱ型、Ⅲ型。 I型PI3K又分为IA和IB两个亚型,他们分别从酪氨酸激酶连接受体和G蛋白连接受体传递信号,其作用是催化磷脂酰肌醇(P1)在D3位的磷酸化,把底物PIP2转化为PIP3。IA型P13K是由催化亚单位Pll0和调节亚单位P85所组成的二聚体蛋白,具有类脂激酶和蛋白激酶的双重活性。在正常细胞中,P13K的活性是受许多机制严格控制的。一般认为,在静息细胞中,无活性的P85―P1lo复合物普遍
yys700714 请问如何用免疫沉淀法测PI3K活性呢?我查到相关文献,写得很清楚的,不过还是不太懂,不知需要准备什么试剂,需要什么仪器测定,TLC是什么啊,是不是需要荧光图像仪?很多疑问,请求做过的高手给予指点。多谢!! yhwangcams 建议可以使用Echelon的PI3-K ELISA试剂盒。 http://www.echelon-inc.com/ccp1231-pi3-k-elisa-kit-k
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