Chicken末端脱氧核糖核酸转移酶(TDT)ELISAKi

原位末端转移酶标记技术检测凋亡

  （一）原理   凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点（缺口），暴露出大量3- 羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT ）将标记的dUTP 进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。   （二）荧光标记法   1 ．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell

原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡

的3-OH末端。而TdT具有构型非特异性与3´-OH端部位的碱基结合的功能。因此，在末端脱氧核糖核酸转移酶或DNA多聚酶介导下，可使生物素化的dUTP标记至DNA断裂后形成的3´-OH末端，借生物素和亲和素的特异结合，使过氧化物酶连接至DNA断点，最后加入底物显色，可在荧光显微镜下观察，计数着色的凋亡细胞。

教您正确选择逆转录酶，适用 6 种不同应用

酸，而 AMV 逆转录酶表现出更高的错误率。 逆转录酶可展现出末端核苷酸转移酶（TdT）活性， 对于 RNA 测序（RNA-Seq），TdT 活性可以诱导逆转录酶特异性地向 cDNA3′ 末端加入一系列 Cs。在高浓度镁和/或锰离子条件下的 cDNA 合成期间及合成后阶段，这种类型的 TdT 活性会被触发。结合特殊设计的具有 3’Gs（称为模板切换寡核苷酸）的 DNA 寡核苷酸，TdT 活性可以特异性地修饰 3’cDNA 末端和 5′ RNA 末端。这些序列修饰的实例包括引入用于随后 cDNA 合成