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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
大鼠肺成纤维细胞
Cat NO.: CP-R006
1.产品名称:大鼠肺成纤维细胞
2.组织来源:肺组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠肺成纤维细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持肺器官的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
5.方法简介:
华韵实验室分离的大鼠肺成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的大鼠肺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-R006 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
大鼠肺成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验瓶倾斜放置在温箱中,干贴壁2-4 h后,将培养瓶慢慢翻转平放,继续静置培养。注意上述操作过程中动作要轻柔,让液体慢慢覆盖组织小块,严禁动作过快致使液体产生的冲力使粘贴的组织块漂起而造成原代培养失败。48 h后换液,更换2-3 ml即可。 2.6 贴块贴壁72 h后,镜下可见大量的成纤维细胞爬出,将组织块去除,继续培养2-3天,待细胞长满,即可传代。注:因为血清浓度低,内皮细胞可以爬出少量,但是很快就会死掉。 2.7 传代用0.25%胰酶常规消化,以1:2传代,传代完后,采用
成纤维细胞染色,效果仍然如此, ilzmx 这是我用小鼠成纤维细胞染色的照片 yuan0553 我曾经做过大鼠肺2型细胞,效果还可以,至少能传递3层。当时用的是荧光素钠,好像分子量比荧光素还要小。是不是分子量小,穿透力就强啊(我很久没碰实验了,也许是错的) ilzmx 谢谢楼上,文献中我没查到用荧光素钠的,实验还是没有进展,还有人做过这个实验吗,
的酶、优化酶浓度和孵育时间,大部分组织都常用酶解法。 (3)组合法:即机械解离+酶解,使组织均匀充分地接触酶消化液,减少了强机械力和过长酶消化时间对细胞造成的伤害。有商品化的经过验证的解离试剂盒可以选择,搭配全自动组织解离仪,做到高效而稳定地组织解离。 5. 如何解离肿瘤组织? 由于肿瘤组织异质性高细胞类型多(肿瘤细胞、成纤维细胞、免疫细胞、内皮细胞等)、细胞间连接紧密细胞外基质异常沉积、结构和微环境复杂、异常代谢等问题,肿瘤组织的解离较为困难。样本的选取需要合适,并且也要根据不同的肿瘤组织特
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