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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFG70485
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验的细胞周围形成园形的溶血区,称为溶血空斑。每一个溶血空斑即代表一个Ig分泌细胞。 二、试剂及材料 1. 1:2 SRBC/阿氏液 2. SPA 3. 豚鼠补体 4. 多克隆兔抗人Ig(56℃,30min灭活) 5. 多克隆诱导剂 三、操作方法 1. 抗体分泌细胞的诱导: ①将分离的PBMC或B细胞用含5%NCS的RPMI-1640培养液洗涤3次,每次1000r/min离心10min,以除去外源Ig; ②用含10%NCS的RPMI-1640培养液调整细胞
红细胞免疫功能检测技术(Erythrocyte immune function detection technique)
混合花环试验、单克隆抗体Coombs试验、抗C 3b R单克隆抗体法、ELISA、放射配体结合法、红细胞促吞噬作用测定法等。 本实验以红细胞C 3b R花环及IC花环试验和红细胞SPA酵母混合花环试验为例,介绍红细胞免疫功能的检测方法。C 3b R酵母花环试验用于检测红细胞C 3b R,原理为用小鼠等血清(补体)致敏后的酵母菌,使菌体表面吸附C 3b ,可与红细胞表面的C 3b R结合,从而将酵母细胞吸附在红细胞
网络 第二节 主要病原性立克次体 一、普氏立克次体 普氏立克次体(R.prowazekii)是流行性斑疹伤寒的病原体。 (一)生物学特性 短杆状,0.8~2.0×0.3~0.6um,单个存在或呈短链排列。在宿主细胞的细胞质内生长。 鸡胚高度敏感,接种后于4~13日内死亡。接种豚鼠或家兔睾丸或兔眼前房是保菌的良好方法。
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