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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFP40694
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验,趁热分装,分装后放在4度,不要冰冻。 问:明胶消毒之后可以放置多长时间?还是现配现用呢?你说的分装是指直接铺在培养瓶吗?如果不是的话,放在4度冰箱不是已经固定了吗?固定之后有怎么铺在培养瓶呢?因为是没做过实验所以很不明白。 答:sigma 有现成的终浓度是2%的明胶,已消毒,买来即可使用,方便而且不贵,仅100多块钱。4度时明胶是胶冻状,室温下放置20-30分钟就可变成液态,说明书上建议使用的包被密度是5-10ug/cm2。 国产明胶就可以的,用去离子水配成1%即可。可以一次配50
6-sulfonic acid),2,2'-连氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯呆-6磺酸)。6、96孔ELISA板。7、0.15mol/L,pH7.4 PBS:配其它液体用。8、包被缓冲液: 0.05mol/L,pH9.6 Na2CO3-NaHCO3缓冲液。9、洗涤液: 0.05%Tween 20-PBS。10、稀释液:4%PEG-洗涤液(用于稀释标准品和酶标抗体)。11、底物缓冲液:0.1mol/L,pH5.0柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液。12、3%H2O2。13、血清、枸缘酸盐或EDTA抗酸血浆、其它体液及细胞
反应20分钟后,洗板5次,洗板操作同步骤4。 6.显色和终止反应:将底物A、B液各50ul(或1滴)加到反应孔内,37℃避光显色10分钟。每孔加入终止液50ul(或1滴)混匀终止反应。 【结果判定】 1.酶标仪设定波长450nm,先用空白调零,然后测定各孔OD值;如果选用双波长测定,不必设置空白对照孔。 2.当阴性对照平均OD值小于0.08,阳性对照(pc)OD值大于0.30时,说明试剂盒有效且实验操作正确,否则应当重复
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