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- 文献和实验
- 技术资料
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5
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96T
产品货号:XFC81213
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验-132-997)进行进一步纯化以满足测序要求。 FFPE 样本(福尔马林固定石蜡包埋):甲醛固定导致蛋白质和核酸发生交联和片段化,无法用于制备活细胞。此类样本同样可以使用商业化试剂盒(130-134-089)分离细胞核进行 snRNA-seq 或使用解离试剂盒(130-118-052)解离分选后进行基因组分析。 自动化样本解离制备细胞平台 (1)传统细胞制备方法的局限性 传统的样本制备方法,尤其是对复杂实体组织(如肿瘤、脑组织、纤维化组织)的处理,长期以来严重依赖手动操作。手动解离
家公司的免疫沉淀试剂盒还是 SimpleChIP® 试剂盒,结果均是如此。在分析稳定性较低的相互作用,比如 polycomb 蛋白(Ezh2 [D] 或 SUZ12 [E])与特定基因的结合时,这一点尤其明显。 第 3 步 - 选择抗体 非高度特异的靶标抗体可能会出现不可预见的结合并增加背景信号,从而增加检测低丰度或低稳定性相互作用的难度。 您的抗体应该满足以下标准: 靶标特异性: 抗体应与阳性/阴性对照细胞系、敲除细胞或经过 siRNA
4月6日,国际著名学术期刊《血液》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所发育与疾病实验室及瑞金医院医学基因组学国家重点实验室的最新研究发现:进化上高度保守的PTEN-C/EBPa-CTNNA1信号轴控制造血干细胞发育与白血病干细胞恶性转化。 该实验室前期研究表明CTNNA1基因(编码alpha-catenin蛋白)在正常造血干细胞表达,但在伴有5号染色体长臂缺失的骨髓增生异常综合症和急性髓系白血病患者的白血病干细胞(或白血病起始细胞)中表达水平显著降低
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