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- gemig
- XFP41221
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFP41221
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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确的。因此，推荐先确定样本的线性范围，可稀释样本来创建标准曲线。根据标准曲线来鉴定饱和点和所需的总蛋白量。✦ 表达强度及稳定性确保选择的内参在样品中高表达。大多数常用的内参蛋白是由保守基因高表达的，这些保守基因是细胞发育及维持细胞活力所必须的（即看家基因）。此外，还应该选择表达不受实验变量影响的内参。最佳的内参应当不受样本来源（如正常和疾病样本）、实验条件的影响。例如，GAPDH 不适用于氧相关研究，因为缺氧可能上调 GAPDH 的表达。✦ 常用的内参蛋白大小及使用注意事项请见如下表格：WB 中如何使用内参
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