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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFC80954
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验1.结核病的特异性抗体:在结核性浆膜腔积液中存在特异性IGG抗体,常用ELISA法或ABC-ELISA法检测,由于各试剂盒选用抗原不同,如结核杆菌化蛋白衍生物或结核分支杆菌抗原等,检测方法差异造成结果的敏感性和特异性也不同,一般认为用Ag5作抗原最佳。近年来用聚合酶链反应检测积液中结核杆菌DNA,是目前最敏感的特异性检查方法,但应注意由于污染而造成的假阳性。 2.肿瘤标志物 (1)癌胚抗原(CEA):CEA是一种分子量较大的糖蛋白,当积液中CEA>20μg/L,积液
中AFP可见升高。4.妇女妊娠3个月后,血清AFP开始升高,7~8个月时达到高峰,一般在400μg/L 癌抗原50(CA50) 正常情况:0 ~ 23 kU/L CA50和CA19-9有一定的交叉抗原性,主要用于胰腺癌,结肠直肠癌,胃癌的辅助诊断和监测肿瘤的进展。 异常情况: 1.胰腺癌,结肠癌,直肠癌,胃癌等胃肠道恶性肿瘤时血清cA50升高,特别是胰腺癌患者升高最为明显。
TCC TTG GTT CCA GCA……GAA GAT GTA ATC TAA C 3' G AAC CAA GGT CGT……CTT CTA CAT TAG ATT GAG CT 2、用胶回收试剂盒回收目的片段; 3、合成Kozak序列: 方案1: Nhe I GCTAGCATGG CGATCGTACCCTAG 方案2: Nhe I ACGGCTAGCATGG TGCCGATCGTACCCTAG 4、用T4DNA连接酶将目的片段与Kozak序列联接起来; 5、用Nhe
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