- ￥1280
- gemig
- XFS90485
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFS90485
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验PI3K ― Akt 信号通路PI3K是一个复杂的大家族，根据其结构可分为3类：I型、Ⅱ型、Ⅲ型。 I型PI3K又分为IA和IB两个亚型，他们分别从酪氨酸激酶连接受体和G蛋白连接受体传递信号，其作用是催化磷脂酰肌醇(P1)在D3位的磷酸化，把底物PIP2转化为PIP3。IA型P13K是由催化亚单位Pll0和调节亚单位P85所组成的二聚体蛋白，具有类脂激酶和蛋白激酶的双重活性。在正常细胞中，P13K的活性是受许多机制严格控制的。一般认为，在静息细胞中，无活性的P85―P1lo复合物普遍
birano 强烈推荐美国Echelon，PI3K活性检测试剂盒，通过对PI3K代谢物PIP2，PIP3进行检测，直接反映PI3K激酶活性,而且非同位素标记，无放射性。只是价格有点小贵，如果经费充足，可以考虑。 www.echelon-inc.com 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
yys700714 请问如何用免疫沉淀法测PI3K活性呢？我查到相关文献，写得很清楚的，不过还是不太懂，不知需要准备什么试剂，需要什么仪器测定，TLC是什么啊，是不是需要荧光图像仪？很多疑问，请求做过的高手给予指点。多谢！！ yhwangcams 建议可以使用Echelon的PI3-K ELISA试剂盒。 http://www.echelon-inc.com/ccp1231-pi3-k-elisa-kit-k
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