细胞上清外泌体(Exosome)提取试剂

细胞上清外泌体(Exosome)提取试剂
英文名：Exosome Isolation Reagent （for Cell Culture Supernatant）
描述：
细胞内存在许多膜性囊泡(vesicle)结构，可以分泌排到胞外－－即外泌体(exosome)，也称为microvesicle或microparticle－－它们均可称为extracellular vesicle。外泌体直径约30~150 nm，携带多种核酸，蛋白酶、MHC、骨架蛋白、热休克蛋白、miRNA和脂质信号分子。外泌体分泌到细胞外基质后，可经血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、淋巴等体液运送到相邻或远隔的组织细胞并被其摄取，因而在同类或不同类型的细胞间的物质和信息远程交换中起重要作用。外泌体调节许多细胞功能，如免疫调控、肿瘤新生和转移，或为疾病早期诊断标志物，也可作为药物载体。外泌体分离纯化的经典方法是超速离心或密度梯度离心法，但需要超速离心机和大量样品、操作繁琐耗时，回收率和纯度不稳定。普利莱的外泌体制备试剂盒能替代超速离心法，适应少至100µl 的样品，只需孵育和台式离心，即可制备出高纯度外泌体，用于后续蛋白、RNA检测试验。
储存：
常温运输。
4 ºC保存 12个月有效
适用范围：
细胞上清、组织培养上清，人或动物体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、淋巴液、羊水、腹水。
可用于后续电镜观察、NanoSight纳米粒度分析，加入细胞共培养，Western blot、ELISA、蛋白质组学分析，小RNA提取和qPCR。
只需少量样品、孵育和台式离心，外泌体回收率稳定、结构完整纯度高。
是国内性价比最高的外泌体提取试剂盒。
说明：
通常1 ml细胞培养上清分离的外泌体能满足一次Western blot实验。外泌体常见标志蛋白CD63, CD9, CD81, Tetraspani, HSP70，可用普利莱的RIPA Lysis Buffer #C1053、全套Western blot试剂、Super ECL Plus超敏发光液 P1010检测。普利莱RNAtrip LS液体样品RNA提取试剂可纯化外泌体小RNA。  
若提取外泌体用于蛋白分析，对于外泌体含量高的样品：血清、血浆、腹水、唾液、乳汁，可采用500µL (或100-500µL)的初始样品量，再加入等体积的预冷PBS缓冲液稀释混匀，然后根据稀释后的终体积，再加入0.2体积的外泌体提取试剂。对于外泌体含量较低的样品：组织块培养上清、细胞培养上清、尿液、脑脊液，可采用1 ml样品体积，不用PBS稀释，处理后直接加入提取试剂。若提取的外泌体用于小RNA和qPCR分析，建议采用较大体积的样品，例如5-10ml。
采用EDTA而非肝素抗凝血，以免影响后续PCR。
细胞培养基血清富含外泌体，100,000g超速离心过夜可去除血清外泌体；可选择无血清培养或换无血清培养基48小时再提取外泌体。