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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,按要求保存,12个月有效。
- 库存:
现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
3×50ml
用途:含有RIPA裂解液(强)、RIPA裂解液(中)和RIPA裂解液(弱)各50ml,以及PMSF 2ml,便于实验时探索不同的实验条件。
注意事项:主要由NP-40、脱氧胆酸钠、磷酸钠、SDS、EDTA、蛋白酶抑制剂等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储运及效期(运输/储存/有效期):低温运输,按要求保存,12个月有效。
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文献和实验保存。 13、如何鉴定提取的外泌体? 通常会用到:透射电镜检测(形态)、NTA 粒径检测(大小)、Western Blot 检测等方法对提取的外泌体进行鉴定。在进行 Western Blot 检测时,常用的外泌体标志蛋白有CD63、CD9、CD81、TSG101 等。 14、提取的外泌体进行 Western Blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解? 需要。一般按照 1:1 的比例加入强 RIPA 试剂,或推荐使用外泌体蛋白专用裂解液。 15、进行外泌体 Western Blot 鉴定时有无内参
有黑点。 方法4 免疫印迹 1样品制备和蛋白定量 1.1 容液配制 10ml100mmol/L PMSF:0.1742g溶于10ml的异丙醇中,至与4?C保存。 50ml 5mol/L NaCl:14.61g溶于40ml三蒸水中,定容至50ml。 100ml 20% SDS:20g溶于80ml水中,加热溶解,定容至100ml。 100ml 1mol/LTris-HCl: 12.114g溶于80ml三蒸水中,定容至100ml。 配RIPA裂解液
2、PMSF 3、Pepstation 4、Leupeptin(亮抑蛋白酶肽) 提取方法: 1、配制裂解液:10ml RIPA 加入四种抑制剂(按要求稀释) 2、加裂解液60µl,低温刮净细胞,抽打数次。 3、4℃离心,14000g,20min 样本收集后-20℃保存 蛋白浓度测定BSA 标准曲线绘制: 1、配制不同浓度的蛋白液浓度分别为:1000µg/ml、750µg/ml、500µg/ml
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