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1年
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深圳顺辰生物科技有限公司
Fluo-8,AM,新型钙离子荧光探针测定试剂盒
描述:
钙离子浓度变化是活细胞接受外界刺激后产生级联反应的重要信息传递方式,因此细胞内钙离子检测是信号转导G蛋白偶联受体(GPCR)介导的相关药物筛选、以及其他相关实验中非常重要的一种研究手段,该领域中常使用钙离子荧光探针与钙离子的特异性结合来观察细胞内钙离子浓度水平的变化。Fluo-8, AM是目前灵敏度最高的可见光激发波长Ca2+绿色荧光探针。Fluo-8, AM是Fluo-8的一种乙酰甲酯衍生物,具有细胞膜渗透性,只需与细胞简单孵育培养,即可进入细胞内,生成不具膜渗透性的Fluo-8,与细胞内游离Ca2+结合,其荧光强度显著增强,一般情况,细胞受到药物处理后,Ca2 +浓度通常增加5至10倍, 所显示光谱可被荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜、荧光酶标仪等多种仪器检测。
Fluo-8,AM, 新型钙离子荧光检测探针优势如下:
1、 Fluo-8的吸收峰和发射峰分别为490 nm和514 nm。可以用488nm的氩离子激光很好地激发,其荧光强度随Ca2+浓度而增加。
2、 对Ca2+变化水平检测敏感度更高,Fluo-8与细胞内Ca2+结合后,荧光增强大于200倍,比常用的Fluo-3强四倍、比Fluo-4强两倍。
3、 Fluo-8,AM具有较弱的温度依赖性,在室温或37℃与细胞孵育均可;而Fluo-3,Fluo-4严格要求在37℃孵育。
4、 应用广泛,与许多细胞系和靶向样本兼容,不会受配体或靶标本身信号干扰。
组成:
Fluo-8,AM母液(250X) 45ul -20℃ 避光保存
Pluronic F127 母液 45ul 4℃ 保存
稀释缓冲液 80ml 4℃ 保存
储存:
按要求保存,一年有效。
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文献和实验作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂,可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化,Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯,成为脂溶的Fluo-3留在细胞内,当Fluo-3与细胞内游离钙结合后,其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上,当用480nm波长激发时,其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下:1、钙荧光探针负载;取细胞悬液,加Fluo-3-Am至10μmol/L,置二氧化碳培养箱中孵育1h,其间轻微振荡3次。离心,去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
相关,神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰。神经元钙成像(calcium imaging)技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示剂,calcium indicator),将神经元当中的钙离子浓度通过荧光强度表现出来,从而达到检测神经元活动的目的。 钙离子指示剂 现在广泛使用的钙离子指示剂主要有化学性钙离子指示剂(chemical indicators)和基因编码钙离子指示剂(genetically-encoded
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