- ￥90
- AMEKO
- 国产
- RC60104-500ml
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温,12个月
- 库存：
现货
- 供应商：
鹿森生物
- 规格：
500ml
用途：用于含病毒样本的保存
注意事项：含胍盐、磷酸盐等成分。
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文献和实验动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
室一般用1：250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长，则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞，导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力，所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时，可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。 细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化
灭菌锅、磁力搅拌器。 材料：3000ml锥形瓶、250ml或500ml培养瓶、翻冒塞、饭盒、pH试纸、孔径0.22μm的微孔滤膜。 试剂：盐酸、无离子水、小牛血清、合成培养基(RPMI1640)、青霉素、链霉素、NaHCO3。 四、 实验步骤 (一) 准备和安装滤器 在超净工作台内打开包有清洗灭菌好的过滤器的牛皮纸，并架好。胶管一段接入滤泵再插入待除菌的液体中，出口端胶管伸入到已消毒的瓶子中。用滤泵做正压过滤，压力数字为2。过滤后检查滤膜是否完好
液，上下颠倒充分混合，7500×g，4 ℃，离心 5 min，回收上层水相；5. 加入 1/10 倍体积的 65 ℃ 预热 CTAB/NaCl 溶液，上下颠倒混匀；6. 用等体积的氯仿/异戊醇抽提，混匀，离心，回收上层水相；7. 加入 1 倍体积的 CTAB 沉淀液，上下颠倒混匀，如果沉淀可见，继续做步骤 8，也可于 65 ℃ 温育 30 min；8. 500×g，4 ℃，(或约 2700 rpm) 离心 5 min；9. 移出上清，用高盐 TE 缓冲液重悬沉淀 (按每克起始材料加 0.5～1 mL
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