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50mL*2
产品货号:XF-J6358
产品规格:50mL*2
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文献和实验台盼蓝(trypan blue)排斥实验一、目的学习台盼蓝排斥实验的原理和方法二、概述台盼蓝又称锥蓝,是一种阴离子型染料,这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。细胞活力常用百分比表示,活力的大小对试验结果有很大影响。细胞活力的测定有许多方法,最简便常用的方法是台盼蓝(trypan blue)染色法。三
材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁
时间过长,会因为胞吞作用进入细胞里,所以时间长了之后看到很多细胞都是蓝色,不一定是细胞死了,可能是台盼蓝进去了,我们一般混合一下就在显微镜下看了,要是死细胞,细胞膜有破裂,细胞很快就蓝了。 答2: 最好采用细胞计数仪计数,这样可以快速有效的将单位体积的总细胞数、活细胞数、死细胞数及细胞活性直接读出,如果用目测法只能将细胞总数大致估计出。 答3 : 3分钟内观察,最好是和细胞混一下就滴出来观察,大于3分钟活细胞也会被染上不准的 答4 : 台盼蓝母液
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