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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
50T
产品货号:XF-J5992
产品规格:50T
产品包装:盒
储存条件及有效期:详见标签
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
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文献和实验迁移实验需要制胶、跑胶、转膜、检测等步骤,操作稍显繁琐;特别是在样本量较大的时候,更显得力不从心。 为了解决这些转录因子检测中的问题,美国Signosis开发出了一种快速高效的半定量活性转录因子检测方法——滤板法。这种方法同样基于转录因子与特定DNA序列结合的原理,以标准96孔板为载体进行实验操作。针对不同的转录因子设计特异性的生物素标记DNA探针,探针与样本核提取物中相应的转录因子结合形成TF/DNA复合物。用滤板除去游离的DNA探针,随后从滤板上洗脱并收集TF/DNA复合物中的DNA探针。用标准
,然后将 NC 膜夹在两层滤纸间,保存于干燥处。五、探针标记进行 Southern 杂交的探针一般用放射性物质标记或用地高辛标记。放射性标记灵敏度高,效果好;地高辛标记没有半衰期,安全性好。这里介绍放射性标记。探针的标记方法有随机引物法、切口平移法和末端标记法,有一些试剂盒可供选择,操作也很简单。以下为 Promega 公司随机引物试剂盒提供的标记步骤:1. 取 25~50 ng 模板 DNA 于 0.5 mL 离心管中,100 ℃ 变性 5 min,立即置冰浴。2. 在另一个 0.5 mL 离心管中
标记DNA探针 如果您有足够量的高纯度模板,建议您采用随机引物标记方法的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I 和II。这两个试剂盒包含了标记、封闭、杂交和检测所需要的所有试剂,是真正意义上的一站式服务的试剂盒。二者之间的差别在于检测方法的不同:Starter Kit
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