Bradford法蛋白浓度测定试剂盒(带附件:BSA标准品

Bradford法测蛋白浓度

  原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465－595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的含量。 溶液： ①Bradford储存液 100ml95％乙醇 200ml88％磷酸 350mgServaG蓝 室温下长期保持稳定。 ②Bradford

考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度

(一)实验原理双缩脲法(Biuret法)和Folin�酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法)，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置(lmax)，由465nm变为595nm，溶液的颜色

献给初学者：WB 如何 1 分钟蛋白定量

曲线是否准确。4. 加入标准品的时候枪头一定不能有残留，否则容易引起较大误差，建议初学者刚开始时做 2 到 3 个标准品复孔。5. Bradford 法加完样之后需立刻马上测量，OD 值能稳定保持 10 分钟左右，如果不能马上测量，建议换用 BCA 法。6. 终极大招：如果你已经是老司机了，还有个方法不用测蛋白浓度，只要在显微镜下估测各组细胞密度差不多，直接提蛋白变性上样跑 WB 即可。但老司机也有翻车的时候，请慎用。只用10秒添加丁香实验随时下拉微信搜索实验ღ( ´･ᴗ･` )手机用户↓电脑用户