尿素-15N2

尿素对蛋白质的变性作用

一、实验目的 1.深入了解蛋白质的变性作用的含义。 2.掌握常用蛋白质变性剂的种类。 二、实验原理 天然蛋自质分子中的肽链以一定的方式盘绕曲折，形成特定的构象。这种构象的维持，主要依赖于蛋白质分子中的氢键。尿素能破坏氢键，导致蛋白质分子结构松弛，使蛋白质变性，变性后，蛋白质的肽链就伸展开来，从而使原来包藏在分子内部的－SH 暴露，能与巯基试剂作用，在一定范围内，暴露的－SH 随着变性程度的加深而增加，因此测定

尿素 urea

CO（ NH2 ） 2 ，亦称脲。相当于碳酸的二酰氨。在人的蛋白质分解最终产物中占有相当大的比例。在普通膳食的情况下，每日尿中可排出 25— 30克，接近尿中总氮量的 87％。一般来说，两栖类的成体、软骨鱼类和哺乳类具有相同的倾向。因在这些生物体中，尿素是在鸟氨酸循环中形成的，所以排出尿素的动物具有所必需的整个酶系统，在动物中欠缺其中任何一种酶便排出尿酸（鸟类）或氨（硬骨鱼类）。刀豆和大豆植物的种子中存在很多的脲酶，它可使尿素水解为二氧化碳和氨。尿素也是很重要的肥料。  

尿素琼脂

成分 蛋白胨      1g 氯化钠      5g 葡萄糖      1g 磷酸二氢钾    2g 0.4%酚红溶液   3mL 琼脂       20g 蒸馏水      1000mL 20%尿素溶液    100mL pH7.2±0.1 制法 将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH,加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121℃高压灭菌15min.冷至50~55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内，放成斜面