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- 规格:
100mL
产品货号:XF-J1871
产品规格:100mL
产品包装:瓶
储存条件及有效期:详见标签
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
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文献和实验血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南(DP304)——动物组织
以下操作按照天根产品 DP304 血液/组织/细胞基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 大鼠肝脏10-30 mg 研磨器2. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管3. PBS溶液,无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文
ug/ml(2) 蛋白酶K:称取20mg蛋白酶k溶于1ml灭菌的双蒸水中,-20℃备用。(3)TE缓冲液(pH 8.0):高压灭菌,室温贮存。(4)酚,氯仿,异戊醇(25:24:1)。(5)异丙醇、冷无水乙醇、70%乙醇、灭菌水。三、操作步骤1. 取新鲜或冰冻动物组织块0.1g(0.5cm3),尽量剪碎。置于玻璃匀浆器中,加入1ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见组织块,转入1.5ml 离心管中,加入蛋白酶K (500ug/ml)20μl,混匀。在65℃恒温水浴锅中水浴30min,也可转入37℃水浴12-24
四乙酸二钠)存在下保持很高的活性。在匀浆后提取DNA的反应体系中,SDS可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与DNA分离,EDTA则抑制细胞中Dnase的活性;而蛋白酶K可将蛋白质降解成小肽或氨基酸,使DNA分子完整地分离出来。 二、 仪器 及试剂 1. 仪器 : 恒温水浴锅、台式离心机、紫外分光光度计(GeneQuant)、移液器、玻璃匀浆器、 离心管 (灭菌)、吸头(灭菌) 三、操作步骤 1. 取新鲜或冰冻动物组织块0.1g(0.5cm3),尽量剪碎。置于玻璃匀浆器中,加入
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