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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃储存
- 英文名:
Electroporation competent cells
- 库存:
询盘
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
E774103-200μl
英文名:Electroporation competent cells
纯度或规格:0
SPU:E774103
CAS:-
存储温度:-80℃储存
运输条件:特低温运输
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞: 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,常用 RM 符号表示。转化方法:电击
Purification Kit 纯化 PCR 产物对比,其中 b 为纯化前 PCR 产物,a 为纯化后产物,M 为 marker。 8. 感受态细胞效率不高?如何制备/选择/保存 制备: 感受态细胞的制备核心步骤包括菌体培养、低温处理、钙离子/电击诱导和分装冻存。实验过程中需注意无菌及低温操作,且需要在大肠杆菌中加入冷冻保护剂(如 10%-15% 甘油或 DMSO),其作用是降低冰点、减少冰晶形成,从而保护感受态细胞的转化效率; 选择: 常见的大肠杆菌感受态细胞有多种,它们具有不同的基因型,通过基因
-钙磷酸复合物黏附于细胞表面,经42℃短时间热击处理,促进细胞吸收DNA复合物。进入细胞的DNA分子 通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。 将经转化后的细胞在选择性培养基中培养,即可筛选出转化体(transformant),即带有异源DNA分子 的受体细胞。 基因导入方法: 1)电击法 (Gene transfer by electroporation) 基因导入方法: 2)基因
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