NUGC-4-pLVX tdTomato-Nluc-Puro

经验分享｜生物发光成像标记物选择

内下降约 70%。GLuc 突变体则具有更持久的类发光动力学，腔肠嗪必须通过静脉或心脏内注射系统注射进行动物成像，这极大地限制了动物的吞吐量。最后，GLuc 发出蓝光，峰值为 480 nm，限制了组织在体内成像的穿透。特别地，GLuc 在表达后，可有效从哺乳动物细胞中分泌出来，因此可以通过检测量化细胞培养基中荧光素酶活性。 NanoLuc 荧光素酶（NLuc）是一种来源于深海虾的新型荧光素酶，其分子量只有 19 kDa，可从哺乳动物细胞中分泌出来，也不需要翻译后修饰。不依赖于 ATP，底物

「癌细胞」：是我杀了我？PNAS 这项研究竟让肿瘤自己杀死自己

。 图片来源：PNAS 光学清除 BT474 肿瘤的成像细胞术 PACT（passive CLARITY）成像技术包括原位和提取后组织标记、保持和清除。研究人员使用 PACT 结合共聚焦成像来可视化和数字化重建肿瘤微环境，从而量化给药治疗的效果。 为了研究肿瘤的细胞组成，研究人员首先构建了 TdTomato 报告细胞系（BT474-TdTomato），通过 FACS 选择中度表达的转导细胞系。然后将 BT474-TdTomato 移植给另一组小鼠，在处理 11 天或 61 天后收集，通过 PACT

Cell：免疫记忆真的是一种「记忆」，可被大脑唤醒！激活特定神经，就可触发免疫反应

的神经联系，因此，作者在 FosTRAP2:tdTomato 小鼠中构建了肠炎模型，并发现在肠道炎症期间，InsCtx 中的神经活动显著增加。 图 1. DSS 诱导的肠炎期间，InsCtx 区域神经元活动增加 因为 InsCtx 不同区域存在不同的功能分化，作者着重关注与交感传入神经和内脏信息处理有关的 InsCtx 右后方区域。定点向这一区域注射包含编码 mCherry 荧光报告基因的 AAV。在 DSS 处理后，作者观察到 InsCtx 右后区域神经活动显著增加，并且被标记处的细胞是神经