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文献和实验Construction of RibonucleaseAntibody Conjugates for Selective Cytotoxicity
-resistant colon cancer cells in vitro and in vivo (7 ). Recently, RNase chemically conjugated to an antibody against CD22 was found to specifically kill Daudi lymphoma cells in cell culture at picomolar concentrations (IC50 , 10-50 pM) and to exhibit potent
【摘要】目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F(ab)2片段表达载体,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达,比较二者的活性差异。方法 从相应的杂交瘤中提取mRNA建立抗CD20 ScFv 噬菌体显示文库,利用PCR方法从阳性克隆扩增抗CD20抗体轻链可变区基因(VL)、重链可变区基因(VH),重组到表达载体pYZF1,构建抗CD20 Fab’和抗CD20 F(ab)2达载体pYZF1cd20和pYZcpp3,并在16c9菌中高效表达。MTT法测定Fab’和F(ab)2对Raji和Daudi
LAK细胞和TIL活性的测定基本同NK活性测定方法。但所用靶细胞为对NK不敏感的肿瘤细胞,如Raji、Daudi或自体肿瘤细胞。常采用同位素法如51 Cr释放试验、发光免疫测定法及MTT比色法等。 在此介绍MTT比色法。 试剂及材料 1. 试剂:①四甲基偶氮盐(MTT);②酸化异丙醇:含0.04mol/L HCl的异丙醇;③96孔细胞培养板。 2. 肿瘤细胞系: Raji细胞、Daudi细胞为B细胞性白血病细胞株;Molt-4为T细胞性白血病细胞,对LAK细胞敏感
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