easyLNP™ Plus 通用型RNA细胞转染试剂盒

easyLNP™ Plus 通用型RNA细胞转染试剂盒是一种基于脂质纳米粒（LNP）技术研发的新型即用型转染试剂，广泛适用于不同类型 RNA 在贴壁或悬浮的常用细胞中的转染。 
产品特点：
转染机制独特：该脂质纳米粒与 RNA 混合实现瞬时包封，利用 LNP 独特的跨膜转运和内体逃逸机制，实现对 RNA 高效递送。 
操作方便快捷：该产品与 RNA 形成复合物后，无需静置孵育，可立即进行转染操作，缩短实验时长。转染后无需更换培养基，操作简单。 
质量安全可靠：本品经 0.2μm 微孔滤膜过滤，质量稳定，采用新型生物可降解脂质材料，细胞毒性极低，同时不含乙醇，可避免乙醇导致的细胞失活。
产品组成：

名称	1.5mL	3mL	5mL
纳米混悬液	1.5mL	3mL	5mL
Buffer	8mL	8mL×2	8mL×3

适用范围：适用于绝大多数真核细胞 RNA 体外转染，其中 RNA 类型包括siRNA、miRNA、gRNA、mRNA、saRNA 和 circRNA 等。

适用于常用细胞 mRNA 和短链 RNA 转染

1、操作流程（推荐用量Ⅰ）：

2、不同培养容器中每孔 RNA 和纳米混悬液用量（推荐用量Ⅰ）：

mRNA细胞转染步骤	试剂	96孔板	24孔板	6孔板
（1）40ng/μL mRNA 预混液制备	Buffer（以 mRNA 原液浓度 1μg/μL 为例）	2.4μL	12μL	60μL
	mRNA	0.1μg	0.5μg	2.5μg
（2）mRNA-easyLNP Plus复合物制备	easyLNP Plus纳米混悬液	2.5μL	12.5μL	62.5μL
	mRNA 预混液	2.5μL	12.5μL	62.5μL
（3）加入细胞	mRNA-easyLNP Plus 复合物	5μL	25μL	125μL

短链细胞转染步骤	试剂	96孔板	24孔板	6孔板
（1）40ng/μL 短链RNA 预混液制备	Buffer（以 短链RNA 原液浓度 100ng/μL 为例）	0.6μL	3μL	15μL
	短链RNA	40ng	200ng	1μg
（2）短链RNA-easyLNP Plus复合物制备	easyLNP Plus纳米混悬液	1μL	5μL	25μL
	短链RNA 预混液	1μL	5μL	25μL
（3）加入细胞	短链RNA-easyLNP Plus复合物	2μL	10μL	50μL

3、操作流程（推荐用量Ⅱ）
4、不同培养容器中每孔 RNA 和 纳米混悬液用量（推荐用量Ⅱ）

mRNA细胞转染步骤	试剂	96孔板	24孔板	6孔板
（1）40ng/μL mRNA 预混液制备	Buffer（以 mRNA 原液浓度 1μg/μL 为例）	2.4μL	12μL	60μL
	mRNA	0.1μg	0.5μg	2.5μg
（2）easyLNP Plus 预混液制备	Buffer	1.25μL	6.25μL	31.25μL
	easyLNP Plus纳米混悬液	1.25μL	6.25μL	31.25μL
（3）mRNA-easyLNP Plus复合物制备	easyLNP Plus预混液	2.5μL	12.5μL	62.5μL
	mRNA 预混液	2.5μL	12.5μL	62.5μL
（4）加入细胞	mRNA-easyLNP Plus 复合物	5μL	25μL	125μL

短链细胞转染步骤	试剂	96孔板	24孔板	6孔板
（1）40ng/μL 短链RNA 预混液制备	Buffer（以 短链RNA 原液浓度 100ng/μL 为例）	0.6μL	3μL	15μL
	短链RNA	40ng	200ng	1μg
（2）easyLNP Plus 预混液制备	Buffer	0.5μL	2.5μL	12.5μL
	easyLNP Plus纳米混悬液	0.5μL	2.5μL	12.5μL
（3）短链RNA-easyLNP Plus复合物制备	easyLNP Plus 预混液	1μL	5μL	25μL
	短链RNA 预混液	1μL	5μL	25μL
（3）加入细胞	短链RNA-easyLNP Plus复合物	2μL	10μL	50μL

2-8℃保存，有效期12个月。不可冷冻，常温运输。

1、RNA 原液的最佳溶剂为无酶水，且 mRNA 浓度不低于 200ng/μL、短链 RNA 浓度不低于 100ng/μL，其他类型的溶剂对转染效果可能会有一定影响，具体情况可以联系我们。 
2、制备 RNA 预混液请确保使用试剂盒专用 Buffer 稀释 RNA 原液，不得使用 PBS 或培养基。 
3、请确保 RNA 预混液浓度为 40ng/μL。若多种 RNA 共转染，如 CRISPR Cas9 mRNA 与 gRNA 共转染，则 RNA 预混液浓度为 Cas9 mRNA + gRNA 的总浓度，Cas9 mRNA 与 gRNA 的推荐用量比为 1:1～1:2（μg
_mRNA:μg_gRNA），总 RNA 推荐剂量范围 1～2mg。 
4、常见短链 RNA 如 siRNA 如无特殊修饰，1nmol 的质量通常为 13-15μg，准确质量请结合具体序列、修饰情况进行准确计算。 
5、请注意 RNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素，如需增减每孔 RNA 用量，您可以按比例增加或减少加入细胞的每孔 RNA- easyLNP™ Plus 复合物的体积。 
6、RNA- easyLNP™ Plus 复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时，请勿将 RNA- easyLNP™ Plus 复合物置于冷冻条件。 
7、转染前后均无需更换细胞培养基，含有血清、双抗的完全培养基对转染效果无明显影响；转染 6h 以后可按细胞常规培养 流程，进行换液或其他操作。