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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 供应商：
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
冰冻切片抗原修复液（1x）
描述：
冰冻切片抗原修复液(Quick Antigen Retrieval Solution for Cell Sections)是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液，只需室温孵育5分钟即可完成对冰冻切片样品使用多ju甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
储存：
4℃
操作步骤：
1. 将冰冻切片用PBS洗涤3次，每次5min。
2. 将切片浸泡在抗原修复液中，室温孵育5min。
3. PBS洗涤样本切片，重复3次，每次5min。充分洗涤残留的SDS，以免造成抗体失去活性。
4. 封闭液封闭切片。
5. 随后即可进行一抗孵育等后续的免疫染色步骤。
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文献和实验不完全：使用正常山羊血清或 1%～5% BSA 封闭 1h。 （5）离子相互作用造成的背景：降低抗体稀释液的离子强度。 （6）切片或细胞过于干燥或孵育温度过高：实验过程中请保持切片处于湿润状态，一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 （7）内源性过氧化物酶残余：适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 （8）样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久：样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4：为什么会出现非特异性染色，如何避免？ （1）抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色：由于本试剂盒使用
实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原修复液
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法，也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位，在进行抗原修复之前，可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而，这一步骤也需要进一步优化，包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时，通常将其分为两大类：蛋白酶诱导表位修复（PIER）和热诱导表位修复（HIER）。一旦优化，抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复（PIER） 在PIER方法中，蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
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