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- 顺辰生物
- SC-L204
- 深圳
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 保质期：
1年
- 供应商：
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
Western Blot二抗稀释液
英文名：Secondary Antibody Dilution Buffer for Western Blot
产品描述：
二抗稀释液专用于Western blot实验，二抗稀释液中添加了多种抗体保护剂，能增加抗体稳定性，减少抗体非特异性结合，降低非特异性的背景着色，提高试验的特异性和灵敏度。本品不含有叠氮na，不会抑制过氧化物酶标记二抗活性；不含磷酸盐，不会抑制碱性磷酸酶标记二抗活性； 不含脱脂奶粉，不会干扰生物素标记的抗体活性。本品稀释的二抗在4℃保存较长时间，因此可以反复多次使用，节约您宝贵的抗体。
储存条件：
4℃保存，一年有效。
产品规格:
100ml 500ml
使用方法：
1. 颠倒混匀数次，如果有结晶沉淀析出，可以适当37℃加热重新溶解后恢复到4℃。
2. 参考所用的二抗的使用说明以及样品中目的蛋白的含量，按照适当比例例如1:8000、1:5000等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。
3. 一次孵育结束后，置4℃保存，以备下次使用。
产品说明：
1. 低温运输。
2. 本品含有BSA，因此不能用于抗BSA抗体稀释。
3. 建议尽量在4℃进行二抗孵育，以延长稀释后抗体的使用寿命。
4. 本品含防腐剂，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验台面上，四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整；将抗体溶液加到保鲜膜上；从封闭液中取出膜，用滤纸吸去残留液后，将膜蛋白面朝下放于抗体液面上，掀动膜四角以赶出残留气泡；室温下孵育 1～2 h 后，用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次，每次 10 min；再用 TBS 洗一次，10 min。 3. 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触，室温下孵育 1～2 h 后，用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次，每次 10 min；再用 TBS 洗一次，10 min，进行化学
BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
2 hrs，或4 ℃ 过夜。封闭完用TBST 冲洗5 sec。用吸水纸吸去残余液。 II 一抗孵育：按照一抗说明书的推荐比例稀释一抗，使用TBST 或封闭液稀释。在一容器中，将PVDF 膜浸没在抗体溶液里，室温下2 hrs 或4 ℃ 过夜，摇床缓慢摇匀。 III 一抗孵育完后，用TBST 室温下在摇床上洗3 次，每次10 min。 IV 二抗孵育：同上方法准备二抗稀释液并与膜接触，室温下摇床缓慢摇匀1 -2 hrs。 V 二抗孵育完后，用TBST 室温下在摇床上洗3 次，每次10 min
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