- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Agrilactobacillus yilanensis
- 库存:
50
- 供应商:
深圳子科生物科技有限公司
- 细胞形态:
冻干粉;斜面;菌液;平板
- 运输方式:
低温运输
- 规格:
支
深圳子科生物优势代理BNCC品牌菌株、细胞、标准品等,价格优惠,发货迅速,提供周到的售前、售后服务!
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文献和实验在3600 rpm速度下进行离心12 min,丢弃上清。 三、用200 µl 试剂盒中的重悬溶液(Resuspension Solution)对农杆菌沉淀小球进行混匀重悬(蜗旋或用微量移液管上下吹吸)。 四、加入200 µl裂解液(Lysis Solution),上下倒置6-8次混匀(从不同方向倒置),直到变混和液变清变粘为止。不要蜗旋,防止对DNA 剪切。裂解反应不要超过5 min(最后一个样加后计时2 min可也)。 五、加入350 µl 中和/结合溶液(Neutralization
准备:1.灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶,离心瓶4-6个(250ml)。2.试剂:YEP 1200ml(每瓶300ml 共4瓶) Kan 1;1000,Rif1:500。1/2MS 2%蔗糖(灭菌115度20分钟),Silwet在-20℃贮存。3.步骤:共转化农杆菌:于中午12点接菌于有YEP培养液的试管中10μl:10ml接种。28℃,3000rpm摇过夜,约30小时,次日下午6点将已摇活的菌按(1:400)及750μl菌液转至汉300毫升YEP K50 Rif中培养28℃,300rpm
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置
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