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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
Annexin V-FITC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
魔兜儿
- 保存条件:
2~8℃
- 规格:
20T/50T/100T
| 规格: | 20T | 产品价格: | ¥520.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥960.0 |
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥1350.0 |
产品简介
Annexin V-FITC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用绿色荧光染料FITC(Phycoerythrin)标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
检测原理:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。7-AAD是一种核酸染料,同PI有着相似的荧光特性,但其发射光谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,可与Annexin V联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将Annexin V- FITC与7-AAD联合使用时,7-AAD则被排除在活细胞(Annexin V-/7-AAD-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/7-AAD-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Annexin V-FITC和7-AAD结合染色呈现双阳性(Annexin V+/7-AAD+)。
产品规格
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货号 |
C331403E/C331403S/C331403M |
|
规格 |
20 T/50 T/100 T |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
C331403E |
C331403S |
C331403M |
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C331403-A |
重组人Annexin V/FITC (rh Annexin V/FITC)* |
100 μL |
250 μL |
500 μL |
|
C331403-B |
7-AAD Viability Staining Solution(20µg/mL) |
200 μL |
500 μL |
1 mL |
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C331403-C |
4×Binding Buffer |
4 mL |
10 mL |
20 mL |
*来源于大肠杆菌(E.coli),分子量为35.8 KDa,纯度>98%(SDS-PAGE & HPLC)
储存条件
2~8℃储存,勿冰冻。Annexin V-FITC、7-AAD需避光存储。有效期1年。
注意事项
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由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
-
贴壁细胞的消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免机械损伤。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇使胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。尽量不用含EDTA的胰酶消化液,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
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如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。血小板含有PS,可与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并以200 g离心洗去血小板。
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试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体集中至管底,避免开盖时液体洒落引起损失。
-
Annexin V-FITC和7-AAD是光敏物质,操作时请注意避光。
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7-AAD为潜在致癌物,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
-
本产品仅用于科研。
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文献和实验示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
产品名称 规格 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I 100tests 产品组成成分: Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E) Annexin V-FITC (51-65874X











