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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
1年
- 供应商:
深圳顺辰生物科技有限公司
- 保存条件:
常温/冷冻
BCA法蛋白定量试剂盒
产品描述:
Bicinchoninic acid (BCA )法是常用的蛋白定量方法。原理是在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将其还原成Cu1+,BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm处的光吸收值与蛋白浓度成正比,据此可对蛋白定量。与Lowry法相比,BCA方法灵敏度高,操作简单,试剂稳定性强,且受干扰物质影响小。与Bradford法相比,BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。检测线性范围20-2000ug/ml。
组成与储存:
组份 200次 500次 2500次 10000次 储存和效期
BCA试剂 40ml 100ml 500ml 500*4 室温保存,一年有效
Cu试剂 1ml 2.5ml 12.5ml 12.5ml*4 室温保存,一年有效
BSA标准品(4mg/ml) 1ml 1ml 1ml*5 1ml*20 −20ºC,一年有效
所需设备:
酶标仪、可见光分光光度计。最佳工作波长550nm,562nm,可在540-590nm之间。
说明:
1. BCA法物质干扰及耐受的最大浓度见表一。
2. 当样本中含有脂类物质时,用BCA方法检测会使吸光度值整体偏高,可使用改良Lowry法蛋白定量试剂盒(P1509),EDTA浓度大于10mM的样品可用Bradford法蛋白质定量试剂盒(P1510)。
3. BCA法检测范围为20~2000ug/ml,如样本蛋白含量过低,可选用BCA微量蛋白定量试剂盒(P1513)检测范围1~100ug/ml或Bradford法蛋白质定量试剂盒(P1510)。
4. 通常情况下,工作液与样本或标准品37ºC反应30min即可,但严格来讲反应尚未达到终点,通常每10min OD562值升高约2.3%。即便如此,在10min读取OD值,并不会明显影响测定精度。
5. 可通过调整反应温度,60ºC 孵育30min增加检测灵敏度至5~250ug/ml。
6. 本产品仅限专业人员用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗。
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文献和实验形成紫色络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。 现对这两种方法进行比较: 一、实验材料: 细胞总蛋白提取试剂盒(AR0103) M231 BCA蛋白定量试剂盒(AR0146) Commassie改良增强型蛋白质定量试剂盒(AR0145) 二、操作步骤: Commassie法: 1.将BSA冻干标准品(10mg/支)用生理盐水或PBS稀释成2000ug/ml,1000 ug/ml,500
【目的】掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。 【原理】 BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他 试剂 组成的 试剂 ,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+ 还原为Cu+ ,一个Cu+ 螯合二个BCA分子,工作
【实验目的】 掌握用BCA方法测定蛋白质含量的原理和操作方法 【实验原理】 BCA检测法是Lowry测定法的一种改进方法。与Lowry方法相比,BCA法的操作更简单, 试剂 更加稳定,几乎没有干扰物质的影响,灵敏度更高(微量检测可达到0.5μg/ml),应用更加灵活。 蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与Cu 2+ 络合生成络合物,同时将Cu 2+ 还原成Cu
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