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- 2025年07月14日
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1年
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深圳顺辰生物科技有限公司
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常温
蛋白酶+磷酸酶抑制剂混合物哺乳动物专用
英文名Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail for Mammalian (100x)
产品描述:
组织细胞在裂解过程中释放大量的内源性蛋白磷酸酶，能够以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化。本蛋白磷酸酶抑制剂混合物(All-in-One, 100x)包含6种独立的蛋白磷酸酶抑制剂，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白磷酸酶活性，包括蛋白丝/苏氨酸磷酸酶(PP1、PP2A、PP2B、PP2C)、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。该混合物为100倍浓缩水溶液，可直接加入任何类型组织和细胞的裂解产物中，有效抑制磷酸化蛋白质的去磷酸化，从而维护蛋白质的磷酸化状态。适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、测定蛋白激酶活性等实验。
适用：
Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等实验。
组成:
4mL 混合物为100倍浓缩水溶液，包含6种独立的蛋白磷酸酶抑制剂；强烈抑制所有蛋白磷酸酶的活性，包括蛋白丝/苏氨酸磷酸酶(PP1、PP2A、PP2B、PP2C)、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。
储存:
4 °C 12个月有效。储存期间溶液如果出现灰色，不影响使用。
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文献和实验，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该
降低50% 兼容性： Benzonase 核酸酶与蛋白酶抑制剂混合物是可以兼容，但是对于含有EDTA 配方的蛋白酶抑制剂混合物要特别小心，EDTA浓度大于1mM时会抑制Benzonase 的活性。 多样性： 基于各种实际应用和成本的考虑，默克Novagen提供几种Benzonase 核酸酶供用户选择，两种纯度规格，I级为纯度>99%,II级为>99%。每种纯度的产品又提供 两种浓度，标准的(25U/ul)和高浓度的为250U/ul. Benzonase降解
核蛋白提取 实验准备： 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I，II，III，IV总体积，取出液体，并加入蛋白酶抑制剂，（III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物） 实验操作： 1 收集细胞。10ml 对照细胞（1-2*105/ml ）培养48h后，15ml 离心管收集，300g（1370 rpm）* 5min。弃上清，加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃，300g * 5min，弃上清。 3 重悬
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