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文献和实验1、用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放出病毒;2、慢慢搅动并加入NaCl终浓度是0.5mol/L,有助于病毒的沉淀,再等量加入10%PEG(一般使用的是PEG6000就可以了。如果对样品的纯度不是严格要求的话,可以建议使用Millpore公司的离心浓缩柱,Amicon系列的可以一次浓缩15ml样品。);3、4℃过夜或放置一段时间;4、8000/min离心30分钟,收集病毒沉淀;5、将病毒沉淀加入适量的pbs中,4℃过夜;6、10000r/min离心1小时,沉淀即为浓缩的病毒。还可以用梯度
【原创】Lipofectamine? 2000 promega
上海普迈生物科技有限公司http://www.retbio.com新签约promega 产品名称 包装 目录号 价格(元)
tu_guiyun98121 各位大侠好。本人准备做转染细胞,用的试剂是invitrogen的lipofectamine 2000。因为是初次做,有几个问题想请教一下各位高手。谢谢! 1。质粒DNA抽提完后(用除内毒素试剂盒),是否需要除菌。如果需要,一般用什么方法? 2.如果是做瞬时转染,是不是可以不用线性化质粒,而是提完质粒就可以直接用于转染。如果是稳定转染,就要先酶切质粒,使其线性化,然后再转染。 3.invitrogen
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