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爱必信(上海)生物科技有限公司
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文献和实验Communications【4-5】和 Cells【6】发表的三篇文章,整理了人多能干细胞(hPSC)来源的胰岛样类器官培养方案。该培养过程遵循发育原理,由 hPSC 依次分化为定型内胚层 (DE)、胰腺祖细胞 (PP)、内分泌前体 (EP), 最终诱导发育为人胰岛样类器官(human Islet-like Organoid, hILO)。 图 1. hPSC 来源细胞诱导成为胰岛样类器官的培养方案示意图【7】 细胞来源 hPSC 培养试剂配方 包被液 hPSC培养基 Day1 Day
的分枝尖端,形成帽状间充质,促进帽状间充质中的肾祖细胞增殖分化,形成聚集(Pre-tubular aggregate,PA)。随后,PA 和 UB 分别进行间充质-上皮细胞转化(Mesenchymal-epithelial transition, MET)和小管生成,进而形成肾单位【2】。目前广泛用于肾脏研究的人肾脏细胞系忽略了细胞外微环境,与在体的器官类型和整体特性仍存在较大差异,不能充分体现出肾脏的作用及其特点,而三维培养的肾类器官模型为肾脏的研究提供了新途径。人源多能干细胞衍生的肾脏类器官
细胞)、黏蛋白2(MUC2,杯状细胞)、绒毛蛋白1(VIL1,肠上皮细胞)和嗜铬粒蛋白A(CHGA,肠内分泌细胞)的特异性基因表达。各基因表达均以GAPDH表达为内参进行标准化。 D.分化6天的结肠类器官中MUC2(左,绿色)和VIL(右,绿色)的免疫荧光染色。细胞核用Hoechst染色(蓝色)。 7.3D细胞活力检测——hPSC-IOs(大型类器官) 采用3D细胞活力检测试剂盒评估细胞活力。将类器官培养在不透明的多孔板中,按照试剂盒说明书处理样本。根据样本体积和微组织特征优化实验条件。染色后,用荧
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