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- 文献和实验
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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格:
1箱
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文献和实验。过滤除菌操作步骤:首先将过滤器、接液瓶用纸包好,滤膜可放在培养皿内用纸包好。使用前先经121℃高压蒸汽灭菌30分钟;在超净工作台上,将滤器装置装好,用灭菌无齿镊子将滤膜安放在隔板上,滤膜粗糙面向上;然后将待除菌的液体注入滤器内,开动真空泵即可过滤除菌。滤液经培养证明无菌生长后可保存备用。一定要采用质量好的膜,滤纸一定要安装平整,滤纸四周受的张力要均匀,不能有褶皱,你可以一次过滤500ml,免得压力太大,同时负压吸力不要开太大,我以前用的是象呼吸科用的呼吸器,手工挤压丁香园网友solo_wjq的观点
,通过预染蛋白marker来确定电泳停止时间。 (4) 湿转法,转膜条件:300mA恒流;0.45um孔径PVDF膜,转膜时间1h。转膜完成后丽春红染色试剂对膜进行染色,观察转膜效果。 (5) 封闭:将膜完全浸没于5%BSA-TBST中,水平摇床孵育2h(RT)。 (6) 一抗孵育:5%BSA-TBST稀释一抗, 4℃水平摇床孵育过夜。 (7) 次日,洗膜:TBST洗3次,每次10min。 (8) 二抗孵育:5%BSA-TBST稀释二抗:山羊抗兔,山羊抗鼠IgG(H+L)HRP
斯亮兰染色否可以ECL检测稍差可以快速免疫检测否可以SDS存在下蛋白质结合差好质谱分析否可以(尼龙膜和NC膜的特点相似,主要用于核酸杂交)b)膜的大小: 请根据胶的面积来确定.c)膜的孔径: 0.45μm适用一般蛋白质.0.2μm适用小分子蛋白质.购买信息:66485硝酸纤维素膜,0.45um,30cmX3m/卷美国Gelman1395元/卷 硝酸纤维素膜,0.45um,20cmX20cm美国Gelman80元/张 硝酸纤维素膜,0.45um,20cmX20cm国产30元/张60207尼龙
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