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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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100mL
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文献和实验3A,促使 hPSCs 衍生的终内胚层 (DE) 向中肠和后肠内胚层分化,并促进肠管样形态发生,进而产生包含吸收性肠细胞以及主要分泌谱系(包括 Paneth 细胞、杯状细胞和肠内分泌细胞)的肠类器官。 本篇文章基于 Nature protocols【2】 整理了 hPSCs 细胞来源的肠类器官培养方案。 细胞来源 hPSCs 培养基配方 第 1 天内胚层分化培养基 第 2 天内胚层分化培养基 第 3 天内胚层分化培养基 中肠和后肠分化培养基 肠生长培养基 近岸
、将细胞悬液转移至 15ml 离心管中,加入 10ml 预冷的 DMEM/F12 培养基(含10% FBS)。4℃ 条件下 300g 离心 5min,取细胞沉淀。 23、将所得沉淀重复 10-13 步骤,完成 CRC 类器官复苏。 图 2. 显微镜下 CRC 类器官的形态,以及 Ki-67、E-Cadherin 标记物的表达【5】 利用类器官技术,能够将 CRC 和正常结直肠组织在体外进行长期扩增,并且在微卫星稳定(MSS)来源的 CRC 类器官中发现,类器官模型能够保留样本的遗传多样性和形态稳定
mM Y-27632 的 hPSC 培养基,之后用 hPSC 培养基换液。37℃,5% CO2 培养 48 小时。 5、用 DPBS 清洗两次后,进入后续的分化步骤。 二、诱导形成胰岛样类器官 6、每天按照对应的培养基换液,培养到第 15 天时细胞聚成悬浮的小球。 7、继续按照对应的培养基换液,37℃,5% CO2 继续培养至 30 天。 图 2. 流式和免疫荧光鉴定。hPSC 诱导形成的 DE、PF、PP 和 hILO 能够正常表达各自的标记物【4】。标尺,100 μm 可用于医学
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